Page 109 - BAHAN AJAR PRAKTIKUM BIOKIMIA 1 BERBASIS KONSTRUKTIVISME 5 FHASE NEDDHAM
P. 109
3. Ambil larutan asam amino (glisin, tirosin dan triptofan) dengan menggunakan tabung kapiler dan tuang setetes larutan asam amino tersebut pada garis pelat KLT yang sudah diberi tanda
4. Keringkan pelat KLT yang sudah ditetesi larutan glisin tadi dengan menggunakan pengering rambut
5. Ulangi langkah-langkah untuk sampel campuran asam amino yang tidak diketahui
6. Masukkan pelat kedalam chamber KLT dan letakkan pelat KLT tersebut serata mungkin dan sandarkan pada sisinya
7. Biarkan pelat menarik pelarut ke atas pelat sampai kira-kira 1 cm dari ujung
8. Angkat pelat KLT tersebut dan gambar garis lurus melintasi bagian front solvent (front solven adalah garis dimana pelarut berakhir pada plat)
9. Keringkan kembali pelat KLT dengan bantuan pengering rambut
10. Semprotkan pelat KLT yang sudah kering tadi dengan reagen Ninhydrin
11. Keringkan pelat KLT dalam oven pada suhu 105 C selama 5 menit (Ninhydrin akan bereaksi dengan totolan asam amino dan menghasilkan warna yang kompleks)
12. Beri tanda pada bintik-bintik yang berwarna yang telah dihasilkan pada pelat KLT lalu ukur bintik-bintik (warna yang dihasilkan pada pelat KLT) dari titik asal (garis awal)
13. Hitung nilai Rf
Adapun diagram alirnya adalah sebagai berikut.
106
