Page 95 - Buku Ajar Biokimia 2 (Metabolisme)

Gambar 37 Reaksi yang dikatalisis oleh fraksi terisolasi secara in vitro (Sumber: Nelson & Cox, 2013)
Pemisahan kompleks fungsional dari rantai pernapasan. Membran luar mitokondria pertama kali dihilangkan (dalam percobaan) dengan deterjen digitonin. Fragmen membran dalam kemudian diperoleh dengan pecahnya mitokondria secara osmotik, dan fragmen dilarutkan dengan lembut dalam deterjen kedua. Campuran yang dihasilkan dari protein membran bagian dalam diselesaikan dengan kromatografi pertukaran ion menjadi kompleks yang berbeda (I sampai IV) dari rantai pernapasan, masing-masing dengan komposisi protein yang unik, dan enzim ATP sintase (kadang-kadang disebut Kompleks V). Kompleks I hingga IV yang terisolasi mengkatalisis transfer antara donor (NADH dan suksinat), pembawa perantara (Q dan sitokrom c), dan O2, seperti yang ditunjukkan. Secara in vitro, ATP sintase yang diisolasi hanya memiliki aktivitas ATP-hidrolisis (ATPase), bukan sintesis ATP.
93