Page 231 - BUKU AJAR ASAM NUKLEAT

3) Profil DNA Dengan PCR dari Pengulangan Tandem Pendek:
Teknik yang lebih kuat dari profil DNA menghindari keterbatasan analisis hibridisasi dari urutan pengulangan yang tersebar. Pembuatan profil menggunakan rangkaian polimorfik yang disebut STRs (Polymorphic sequences). STR adalah urutan pendek, satu hingga 13 nukleotida panjangnya yang diulang beberapa kali dalam susunan tandem. Dalam genom manusia, jenis STR yang paling umum adalah pengulangan dinukleotida [CA]n di mana 'n', jumlah pengulangan, biasanya antara 5 dan 20. Jumlah pengulangan dalam STR tertentu adalah variabel karena pengulangan dapat ditambahkan atau, dihilangkan oleh kesalahan yang terjadi selama replikasi DNA.
Dalam populasi secara keseluruhan, mungkin ada sebanyak sepuluh versi berbeda dari STR tertentu, masing-masing alel dicirikan oleh jumlah pengulangan yang berbeda. Dalam pembuatan profil DNA, alel dari sejumlah STR yang berbeda ditentukan. Ini dapat dicapai dengan cepat dan dengan jumlah DNA yang sangat kecil dengan PCR dengan primer yang menyatu dengan sekuens DNA di kedua sisi pengulangan. Setelah PCR, produk diperiksa dengan elektroforesis gel agarosa dengan ukuran pita atau pita yang menunjukkan alel atau alel yang ada dalam sampel DNA yang telah diuji. Dua alel STR diperoleh dalam satu sampel DNA karena ada dua salinan dari setiap STR, satu pada kromosom yang diwarisi dari ibu dan satu pada kromosom dari ayah. Karena PCR digunakan, pembuatan profil DNA sangat sensitif dan memungkinkan hasil yang diperoleh dengan rambut dan spesimen lain yang hanya berisi sejumlah kecil DNA. Hasilnya tidak ambigu, dan kecocokan antara profil DNA biasanya diterima sebagai bukti dalam persidangan.
Gambar 149 PCR
224