Page 67 - BUKU REFERENSI KLONING GEN
P. 67
d. Transformasi
Setelah dilakukan ligasi selanjutnya dilakukan transfonnasi sel inang E. coli JM109 dengan cara memasukkan DNA rekombinan ke dalam sel inang. Hasil transformasi ditumbuhkan pada media LB yang mengandung antibiotik ampisilin., IPTG dan X-gal. Hasil transformasi menunjukkan adanya 10 koloni biru dan 81 koloni tidak berwarna.
3. Seleksi koleksi genom
Seleksi plasmid rekombinan terhadap plasmid bukan rekombinan dilakukan atas dasar sifat fenotifiknya yaitu adanya koloni yang berwama biru dan koloni yang tidak berwarna. Koloni bukan rekombinan akan tumbuh dan berwarna biru, hal ini disebabkan plasmid pUC 19 memiliki gen resisten antibiotik ampisilin, dan gen lacZ yang mengode enzim š¯›½š¯›½gaktosidase yang berfungsi memecahkan laktosa menjadi glukosa dan galaktosa. Pada
67
