Page 49 - biology
P. 49
الخطوات :
-2لطع جزٌبات DNAالمستخدمة فً ترتٌب تسلسل التفاعلات الى أجزاء اصؽر باستخدام انزٌم المطع
ٌ -3خلط العلماء DNAؼٌر معروؾ مع انزٌم بلمرة ( DNAانزٌم ٌضاعؾ DNAفً الخلاٌا )
والنٌوكلٌوتٌدات الأربعة () A,T,G,C
ٌ -4تم تلوٌن كل نٌوكلٌوتٌد بلون مختلؾ من صبؽة فلورسنت فً الشرٌط المصنع حدٌثا .
-5كلما دمج نٌوكلٌوتٌد معدل ملون بالفلورسنت تولؾ التفاعل ونجم عن ذلن اشرطة حمض نووي باطوال
مختلفة .
-6تنفصل أجزاء DNAالملونة عن طرٌك الرحلان الكهربابً الهلامً
-7تحلٌل المادة الهلامٌة فً جهاز تلمابً لترتٌب تسلسل DNAباكتشاؾ لون كل نٌوكلٌوتٌد ممٌز .
ٌ -8حدد تسلسل DNAالأصلً من خلال ترتٌب الأجزاء الممٌزة .
تفاعل البلمرة المتسلسل :
ٌستخدم لانتاج ملاٌٌن النسخ من منطمة محددة فً جزء الحمض النووي وهو شدٌد الحساسٌة ولادر
على اكتشاؾ جزئ واحد للحمض النووي DNAفً عٌنة ما .
علل :التفاعل المتسلسل مفٌد جدا ؟
لانه ٌمكن بعد ذلن نسخ هذا الجزئ الواحد من DNAاو تضخٌمه عدة مرات لاستخدامه فً تحلٌل
. DNA
الخطوات :
-2وضع ( DNAمراد نسخه وانزٌم البلمرة والنٌوكلٌوتٌدات الأربعة والبادبتٌن فً أنبوب )
ٌ -3سخن الانبوب وتفصل الحرارة شرٌطً DNAوٌبرد الانبوب فترتبط البادبات ٌ,ستخدم جهاز الً
ٌسمى مبدل درجات الحرارة لتدوٌر الانبوب الذي ٌحتوي كل المكونات التً تدخل فً التفاعل
وتكون درجات الحرارة مرتفعة ومنخفضة
-4ترتبط البادبات بشرٌط واحد DNAوٌدمج انزٌم بلمرة DNAالنٌوكلٌوتٌدات الصحٌحة بٌن
البادبتٌن .تكرر عملٌة التسخٌن والتبرٌد ودمج النٌوكلٌونٌدات من 20-40مرة مما ٌؤدي الى انتج
ملاٌٌن النسخ من الجزء الأصلً .
علل ٌ:عزل انزٌم بلمرة DNAمن بكترٌا حرارٌة تعٌش فً درجات حرارٌة عالٌة مثل الٌنابٌع
الساخنة فً حدٌمة ٌلوستون ؟
لان فصل اشرطة ٌ DNAتطلب حرارة ولهذا ٌجً ان ٌكون الانزٌم لادرا على تحمل درجات
الحرارة العالٌة جدا
ٌعتبر التفاعل المتسلسل من احد الوى الطرق التً تستخدم فً :
-2فً المختبرات
ٌ -3ستخدم فً الطب الشرعً لتحدٌد هوٌة المشتبه بهم والضحاٌا فً التحمٌمات الجنابٌة
ٌ -4ستعٌن به الأطباء للكشؾ عن الامراض المعدٌة مثل الاٌدز
البادبات :هً DNAاحادي الشرٌط لصٌر والبادبة مكملة لنهاٌات جزء DNAالتً سٌتم نسخها
واستخدامها كنمطة بداٌة لتصنٌع DNA
تفصل الأشرطة بالتسخٌن
تربط البادبات عند التبرٌد
نسختان متطابماتان ٌوسع انزٌم البلمرة الشرٌط المتمم بإضافة
النٌوكلٌوتٌدات
49