Page 144 - BUKU AJAR ASAM NUKLEAT
P. 144
Enzim SmaI berikatan dengan sisi restriksi SmaI, yang diberikan di bawah ini:
5'-...CCCGGG...-3' 3'-...GGGCCC...5'
Itu membuat potongan tepat di tengah urutan ini pada kedua helai,menghasilkan ujung tumpul. Sisi pemotongan ditunjukkan di bawah ini:
5'-...CCC↓GGG...-3' 3'-...GGG↓CCC...5'
Fragmen DNA ujung tumpul juga dapat digabungkan satu sama lain oleh DNA ligase. Namun, fragmen berujung tumpul lebih sulit untuk diikat (digabungkan) bersama-sama (reaksi ligasi kurang efisien dan lebih cenderung gagal) karena tidak ada untai tunggal yang menggantung untuk menahan molekul DNA pada posisinya. DNA ligase adalah enzim yang menyatukan ujung-ujung DNA (lengket atau tumpul) dengan membentuk ikatan fosfodiester yang diperlukan untuk melengkapi tulang punggung gula-fosfat dari DNA transgenik yang baru disintesis.
Gambar 87 Pembentukan Ikatan Posfo diester oleh enzim ligase Jenis enzim restriksi endonuklease:
Ada 3 kategori utama enzim restriksi endonuklease:
1. Enzim restriksi Tipe-I
2. Enzim restriksi Tipe-II
3. Enzim restriksi Tipe-III
137
