Page 145 - BUKU AJAR ASAM NUKLEAT
P. 145
Enzim restriksi endonuklease tipe-I:
Ini adalah jenis kompleks endonuklease yang memotong hanya satu untai
DNA. Enzim-enzim ini memiliki urutan pengenalan sekitar 15 bp panjang. Enzim ini membutuhkan ion Mg++ dan ATP untuk berfungsi. Jenis restriksi endonuklease seperti itu memotong DNA sekitar 1000 bp dari ujung 5สน dari urutan DNA yang terletak di dalam sisi pengenalan. Contoh penting dari enzim endonuklease restriksi Tipe-I adalah EcoK, EcoB, dll.
Enzim restriksi endonuklease tipe-II:
Ini adalah Enzim restriksi endonuklease paling penting untuk kloning gen dan
karenanya untuk Teknologi DNA Rekombinan, enzim resstriksi ini paling stabil. Enzim restriksi ini menunjukkan pemotongan hanya di sisi tertentu dan karena itu enzim restriksi ini menghasilkan fragmen DNA dengan panjang yang ditentukan. Enzim-enzim ini menunjukkan pemotongan di kedua untai DNA, tepat di luar urutan pengenalan. Enzim ini membutuhkan ion Mg++ untuk fungsinya. Enzim tersebut menguntungkan karena Enzim restriksi endonuklease tipe-II tidak memerlukan ATP untuk pemotongan dan enzim tersebut menyebabkan pemotongan pada kedua untai DNA. Hanya enzim restriksi endonuklease Tipe II yang digunakan untuk kloning gen karena kesesuaiannya. Urutan pengenalan untuk enzim restriksi endonuklease tipe-II dalam bentuk urutan palindromik dengan simetri rotasi, yaitu urutan basa pada paruh pertama satu untai DNA adalah bayangan cermin dari paruh kedua untai lain dari ganda DNA itu. Contoh penting dari endonuklease Pembatasan Tipe-II termasuk Hinfl, EcoRI, PvuII, Alul, Haell, dll.
Gambar 88 Palindromik dengan simetri putar
138
