Page 23 - BUKU REFERENSI KLONING GEN
P. 23

      b. Vektor
Persyaratan yang paling penting bagi setiap vektor kloning adalah memiliki sarana untuk mengadakan replikasi dalam sel inang. Pemilihan vektor untuk keperluan kloning harus memperhatikan ukuran fragmen DNA yag akan diligasi, efisiensi transformasi yang tinggi, penanda seleksi yang mudah diamati untuk sel transforman dan rekombinan (Brown, 1991). Apabila ukuran fragmen DNA lebih besar dari 40 kb, maka vektor 𝜆𝜆 dan kosmid dapat digunakan secara efektif. Fragmen DNA sisipan yang ukurannya kurang dari 10 kb, maka sebaiknya menggunakan vektor plasmid (Winnacker, 1987). Beberapa vektor plasmid yang sering digunakan untuk keperluan kloning antara lain pBR122, pBR325,dan pUC19, semua vektor tersebut berasal dari bakteri E. coli K-12.
Vektor pUC 19 adalah turunan dari vektor pBR322, membawa gen resistensi antibiotik ampisilin
23
   






























































































   21   22   23   24   25