Page 26 - BUKU REFERENSI KLONING GEN
P. 26

      molekul tersebut dapat dilakukan dengan beberapa cara yaitu:
1) Fragmen DNA sisipan yang mempunyai ujung lengket diligasi dengan vektor yang memiliki ujung lengket, cara ini lebih efisien karena ujung- ujung lengket yang komplemen akan saling berikatan.
2) Ligasi antara fragmen yang berujung lengket dengan yang berujung tumpul memerlukan molekul tambahan yaitu linker atau adaptor.
Linker adalah DNA untai ganda pendek
(oligonukleotida) yang telah diketahui urutan nukleotidanya dan keduanya berujung tumpul, tetapi memiliki sisi pengenal dengan enzim yang menghasilkan ujung lengket. Ligasi DNA akan melekatkan linker pada ujung tumpul DNA, bila dipotong dengan enzim restriksi yang telah ditentukan maka akan menghasilkan fragmen DNA yang berujung lengket Seperti pada linker, adaptor juga merupakan oligonukleotida yang pendek, tetapi
26
   




























































































   24   25   26   27   28