Page 28 - BUKU REFERENSI KLONING GEN

5. Seleksi koleksi genom
Transforman adalah sel yang telah mengalami proses transformasi, sehingga mengandung plasmid tertentu. Pada umumnya vektor kloning dirancang sedemikian rupa sehingga insersi DNA sisipan pada vektor akan merusak integritas satu di antara gen- gen yang terdapat pada plasmid tersebut, misalnya penyisipan DNA sisipan pada gen LacZ, menyebabkan gen ternebut tidak mampu mensintesis enzim 𝛽𝛽 galaktosidase. Seleksi pada tahap ini merupakan seleksi secara fenotifik. Seleksi transforman menggunakan vektor pUC 19 meliputi seleksi resistensi antibiotik ampisilin dan diikuti dengan seleksi terhadap aktivitas enzim 𝛽𝛽 galaktosidase. Sel yang mengandung pUC 19 akan mampu hidup di media yang mengandung ampisilin dan mampu mensintesis enzim 𝛽𝛽 galaktosidase, dengan demikian bila sel transforman dihidupkan pada media yang mengandung IPTG dan X-gal akan berwarna biru. Se! yang mengandung DNA
28