Page 29 - BUKU REFERENSI KLONING GEN

rekombinan juga resisiten tehadap antibiotik ampisilin, tetapi tidak mampu mensintesis enzim 𝛽𝛽 galaktosidase, dengan demikian bila sel transforman dihidupkan pada media yang mengandung IPTG dan X-gal koloni tidak berwarna. Metoda lain yang dapat digunakan untuk menyeleksi gen pada koleksi genom dapat dilakukan dengan beberapa metoda seperti: hibridisasi koloni, hibridisasi asam nukleat (Brown, 1991).
Salah satu metoda yang digunakan untuk menyeleksi koleksi genom adalah dengan cara koloni hibridisasi. Koloni hibridisasi mula-mula diperkenalkan oleh Grunstein dan hognes (1975). Koloni yang diperoleh dari proses transformasi kemudian ditransfer dari cawan agar ke filter nitro selulosa, selanjutnya koloni yang tumbuh pada filter didenaturasi dengan larutan alkali. Filter selulosa kemudian dicuci dan dikeringkan lalu di inkubasi dengan probe yang telah di label dengan senyawa radioaktif, bila ada urutan nukleotida yang
29