Page 22 - Muhammad Faiz Hanni_1101621051_Modul Digital
P. 22
Proses DNA rekombinan meliputi:
a. Isolasi DNA
Dilakukan untuk menyeleksi DNA yang dikehendaki. Langkah-langkah
proses isolasi DNA:
1) Isolasi jaringan
Langkah pertama mengisolasi jaringan yang akan digunakan.
2) Pelisisan dinding sel dan membrane sel
Melisiskan dinding dan membrane sel dengan penggerusan (homogenasi),
sentrifugasi dengan kecepatan lebih dari 1000 rpm atau dengan
menggunakan larutan pelisis sel atau buffer ekstraksi. Inti sel harus
dilisiskan, karena substansi gen yang diinginkan ada didalamnya. Larutan
pelisis sel ini bertujuan untuk melisiskan sel yang tidak mengandung DNA
agar sel yang mengandung inti sel dapat diisolasi atau dipisahkan dari
komponen-komponen sel lainnya yang tidak berfungsi.
3) Pengekstrasian dalam larutan
Supernatan yang terbentuk dibuang dan kemudian dilakukan ekstraksi di
dalam larutan, hal tersebut bertujuan agar di dapat ekstrak.
4) Purifikasi
Pada tahap ini dilakukan pembersihan hasil ekstrak dan zat-zat lainnya. Pada
larutan diberikan RNAse dan diinkubasi selama 10 menit pada suhu 65°C,
hal ini bertujuan agar mengoptimalkan kerja enzim. Penambahan RNAse
berguna untuk menyingkirkan kontaminasi RNA sehingga DNA dapat
diisolasi secara utuh.
Modul Pembelajaran Biologi Kelas XII SMA 16
