Page 9 - MICROBIOLOGY PRACTICUM MODULE

PROSEDUR KERJA:

Alat dan bahan:

1. Media Nutrien Agar (NA) (Oxoid)
2. Media Nutrien Broth (NB) (Oxoid)

3. Aquades
4. Cawan petri

5. Tabung reaksi

6. Batang pengaduk, pipet volume, erlenmeyer, penangas/elemen pemanas
Cara kerja:

1. Timbang media NA (Oxoid) dan NB (Oxoid) sesuai prosedur di kemasan. (Catatan:

Buatlah 50 ml media NA untuk setiap kelompok kecil praktikum dan 50 ml media NB
untuk satu golongan praktikum). Penimbangan media dilakukan secara teliti dan

cepat, kemudian serbuk media dimasukkan secara hati-hati ke dalam erlenmeyer.

2. Tambahkan aquades dan aduk sampai merata dengan batang pengaduk
3. Panaskan dengan hati-hati menggunakan penangas/elemen pemanas sampai media

tercampur homogen (ditunjukkan dengan warna yang kuning jernih). Perhatian: pada

saat pemanasan jangan sampai terbentuk buih berlebihan sampai meluap!
4. Sebelum diautoklaf, tuangkan media NA dengan volume tertentu menggunakan pipet

volume : 5 ml ke dalam tabung reaksi untuk NA miring, 10 ml ke dalam tabung reaksi
untuk NA tegak, 15 ml untuk NA dalam cawan petri untuk percobaan 4b (metode

isolasi pour plate), sisanya untuk NA dalam cawan petri untuk percobaan
(pengenalan mikroba di alam). Tutup tabung reaksi dengan penutup tabung

(penutupan jangan terlalu rapat!)

5. Sebelum diautoklaf, tuangkan NB ke dalam tabung reaksi untuk 6 kelompok
praktikum dalam 1 golongan. Masing- masing tabung reaksi @ 8 ml. Tutup tabung

reaksi dengan kapas atau penutup tabung (penutupan jangan terlalu rapat!)
6. Sterilkan seluruh media dalam tabung reaksi tersebut dengan menggunakan autoklaf

o
selama 15 menit, tekanan 1 atm 121 C. Pelajari cara mengoperasikan autoklaf
dengan benar!

7. Setelah diotoklaf : media NA 10 ml dalam tabung reaksi diletakkan tegak pada rak

tabung dan biarkan memadat, media NA 5 ml inkubasikan miring dan biarkan
memadat. Media sisa NA tuangkan dalam cawan petri dan biarkan memadat (untuk

percobaan: pengenalan mikroba di alam). Media NA 15 ml dibiarkan sampai suhu

9