Page 45 - CUADERNO DE PRÁCTICAS

PRÁCTICA 4: ELECTROFORESIS DE HEMOLIZADO

Los procedimientos de separación de sustancias nos permiten separar e identificar los
componentes de las mezclas. En esta práctica, realizaréis dos tipos de separaciones muy
utilizadas en los laboratorios clínicos: la extracción líquido-líquido para separar los distintos
componentes de la sangre en base a sus diferencias de solubilidad y la electroforesis que separa
los componentes de una mezcla por la diferencia de cargas y/o tamaño

OBJETIVOS:
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1. Comprender los fundamentos de las técnicas de separación por extracción líquido-
líquido mediante la preparación de un hemolizado de sangre.
2. Entender los fundamentos básicos de las técnicas electroforéticas.
3. Interpretar los perfiles de bandas de las técnicas electroforéticas.

DESARROLLO: esta práctica se realizará completamente en los grupos de cuatro personas de
prácticas anteriores. Consta de dos sesiones, la primera de 1,5 horas y la segunda de 2 horas.

SESIÓN 1

Consiste en la preparación de un hemolizado que se analizará en la segunda sesión. Un
hemolizado es un suero en el que los hematíes se han roto y han vertido su contenido.

Material (por grupo): Reactivos:
- Papel de filtro - Cloruro de sodio al 0,9% (diluido del
- Gradilla preparado en la práctica anterior)
- Tubo de ensayo - Agua destilada
- Vaso de precipitados - Cloroformo
- Pipetas Pasteur - Sangre en tubos con EDTA (ácido
- 2 tubos de centrífuga etilendiaminotetraacético,
- Centrífuga (común para todos) anticoagulante). Esta sangre debe ser
- Micropipeta y puntas solicitada al banco de sangre
- Frasco lavador previamente y ser recogida el mismo
día de la práctica.

Para conseguir el hemolizado debéis seguir el siguiente esquema del proceso: