Page 121 - Castro Fernández Arturo-Portafolio de evidencia Análisis clínicos

2. Almacene el hemocitómetro horizontalmente durante al menos 4 minutos a

temperatura ambiente en una cámara húmeda (por ejemplo, en papel de filtro
saturado de agua en un Petri cubierto plato) para evitar que se seque y permitir que

las células se asienten.

3. Examine la cámara con óptica de contraste de fase a × 200 o × 400 Magnificación.

4. Cuente al menos 200 células positivas para peroxidasa en cada réplica, para
lograr un error de muestreo aceptablemente bajo. Las células positivas para

peroxidasa se tiñen de marrón, mientras que las células negativas para peroxidasa

sin manchas.

5. Examine una cámara, cuadrícula por cuadrícula, y continúe contando hasta al
menos 200 Se han observado células positivas para peroxidasa y se ha realizado

una rejilla completa examinado. El recuento debe realizarse mediante cuadrículas
completas; no te detengas en el medio de una cuadrícula.

Prueba para el recubrimiento de anticuerpos de espermatozoides

Los anticuerpos anti-espermatozoides (ASA) en el semen pertenecen casi
exclusivamente a dos clases de inmunoglobulinas: IgA e IgG

Prueba de reacción mixta de antiglobulina

Procedimiento

1. Mezcle bien la muestra de semen.

2. Retire las alícuotas replicadas de 3.5 l de semen y coloquelas en portaobjetos de
microscopio separados.

3. Incluya una diapositiva con 3.5 l de semen positivo para ASA y una con 3.5 l de

semen negativo para ASA como controles en cada prueba directa. Este semen debe
ser de hombres con y sin anticuerpos anti-espermatozoides, respectivamente, como

se muestra en pruebas directas anteriores de MAR. Alternativamente, los

espermatozoides positivos pueden ser producidos por incubación en suero que se
sabe que contiene anticuerpos.