Page 14 - e-MODUL PROJECT BASED LEARNING KIMIA BAHAN ALAM

Cara menghitung nilai Rf:

Retention factor (Rf) merupakan nilai atau ukuran yang mana didapat

berdasarkan posisi noda setiap zat terlarut pada plat KLT.

ℎ
=

Berikut langkah dalam melakukan pemisahan dengan KKG:

a) Kolom KKG dicuci dengan pelarut dari yang paling polar ke yang

non-polar. Disumbat kolom dengan sedikit kapas.

b) Dilarutkan sampel dengan sesedikit mungkin pelarut, kemudian

dimasukkan silika impregnasi ke dalam ekstrak. Diaduk-aduk agar

sampel dan silika menyatu hingga keduanya mengering seperti

serbuk.

c) Dimasukkan silika kolom ke dalam gelas kimia, ditambahkan

n-heksana hingga semua silika terendam (silika basah).

d) Dimasukkan silika basah ke dalam kolom, pastikan tidak ada silika

yang mengering, selalu basahi dengan n-heksana. Pastikan tinggi

silika KKG 15−20 cm didalam kolom. Dan buka kran kolom (jika

kolom menggunakan kran).

e) Saat n-heksana hampir mendekati silika (dalam kolom), masukkan

sampel yang telah diimpreg secara perlahan ke dalam kolom, hati-

hati jangan sampai merusak silika.

f) Dimasukkan eluen yang telah disiapkan secara perlahan, jangan

sampai merusak sampel dan silika.

g) Dilakukan elusi dan eluat ditampung ke dalam vial ukuran 10 mL

untuk setiap noda yang akan turun. Penampungan dipisah dengan

vial lain untuk masing-masing noda yang berbeda. Eluen yang

13