Page 26 - E-LKPD INTERAKTIF STEM MATERI BIOTEKNOLOGI (YULIA WATI)

C. Mendesain dan melakukan penelitian

Untuk memahami tahapan elektroforesis dan PCR maka akan dilakukan

pengamatan melalui virtual lab sebagai berikut:

Link Virtual Lab

Tahap 1: Membuat Gel

Klik dan geser sendok yang berisi sedikit agarose ke dalam tabung erlenmeyer
Tambahkan larutan buffer secukupnya ke dalam tabung erlenmayer
Tekan “open” dan panaskan hingga agarose mencair

Lepaskan plastik wrap dari tabung erlenmeyer dan tuangkan ke dalam cetakan
Letakkan sisir ke dalam cetakan
Biarkan gel dingin dan padat (umumnya selama 1 jam)
Lepaskan sisir secara hati-hati, gel siap untuk di run

Tahap 2: Menyiapkan aparatus gel

Tuangkan larutan buffer ke dalam box elektroforesis
Letakkan cetakan yang ada gel elektroforesis padat ke dalam box elektroforesis

Tahap 3:Memasukkan sampel DNA ke dalam gel
Dengan pipet yang bersih ambil larutan buffer dan kemudian ditambahkan ke
dalam sample DNA
Ambil sample dna yang ditambahkan buffer dan suntikkan ke dalam sumur gel

Dengan pipet yang bersih ambil DNA standar ukuran dan suntuikkan ke dalam
sumur gel yang disampingnya (kosong)

Tahap 4: Menghubungkan arus listrik dan jalankan gel
Waktunya untuk running, sambungkan kabel sesuai dengan warnanya (merah

:kutub positif) (hitam:kutub negatif)
Tekan lubang sesuai dengan warna kabel (masukan) dan nyalakan tombul
power
Gel akan banyak mengeluarkan gelembung (menandakan adanya arus listrik)

DNA berpindah sesuai ke kutub positif, dna yang pendek akan berpindah ke
lubang dengan cepat dibandinglan dengan dna yang panjang
Waktu running sudah selesai dan siap untuk dianalisis

Tahap 5: Noda gel dan analisis hasilnya
Geser hasil elektroforesis dan masukkan ke dalam larutan DNA staining

(ethidium bromide) (menghabiskan waktu selama setengah jam)
Angkat gel dari larutan dna dan letakkan di alat ultra -UV- dan nyalakan alatanya
Sekarang kamu bisa menjawab berapa panjang DNA tersebut

15