Page 55 - Buku Ajar Video Pembelajaran Praktikum Biokimia 1
P. 55
Adapun tahapan kerja dari metode ini terdiri atas dua reaksi yang berbeda. Pertama, protein pada sampel akan direaksikan dengan ion Cu2+ pada kondisi alkalis selama 10 menit yang kemudian akan menghasilkan kompleks Cu- tetradentat. Lalu pada tahapan kedua akan terjadi reaksi reduksi terhadap larutan asam fosfomolibdat-fosfotungstat sehingga menghasilkan warna biru pada larutan.
Pada saat mekanisme peralihan warna, terjadi reduksi pada pereaksi Folin Ciocalteu menjadi heteropolymolybdenum blue (Waterborg and Mattews, 1996; Ledger et al, 2001). Kemudian ketika proses inkubasi, terjadi penataan berulang kompleks biru, dari yang awalnya tidak stabil menjadi kompleks berwarna biru yang stabil dengan intensitas warna yang lebih tinggi. Adapun mekanisme reaksi yang dapat dilihat pada gambar sebagai berikut:
Gambar 7.1 Mekanisme reaksi metode lowry (Pierce, 2005)
Adapun kelebihan dan kekurangan penentuan kadar protein menggunakan metode lowry yaitu, kelebihannya metode ini lebih sensitif sehingga bisa
48
