Page 149 - BUKU AJAR ASAM NUKLEAT

B. Vektor
Kloning gen adalah bagian tak terpisahkan dari manipulasi genetik dan melibatkan penggabungan fragmen DNA yang diinginkan ke molekul vektor yang berfungsi untuk membawa segmen DNA tersebut pada sel inang. Setiap jenis vektor memiliki ciri-ciri yang mungkin tidak ada pada vektor lainnya. Perlu dicatat bahwa setiap jenis vektor kloning memiliki keunggulan tertentu yang membedakannya dari vektor lainnya. Namun, plasmid adalah molekul paling sederhana untuk ditangani. Bakteriofag dan virus lainnya dapat disimpan dengan baik untuk jangka waktu yang lama. Kosmid dan kromosom buatan dapat membawa fragmen DNA yang lebih besar untuk tujuan kloning. Semua vektor harus memenuhi syarat umum yaitu; Vector biasanya ukurannya kecil, Transfer gen dari sel donor ke penerima relatif mudah, Telah diketahui urutan DNAnya, Memiliki setidaknya satu asal replikasi dan mereka dapat bereplikasi di sel inang yang sesuai bahkan ketika mereka membawa DNA asing. Terakhir, kode vektor untuk fenotipe yang dapat digunakan untuk mengidentifikasi keberadaan rekombinan dan vektor induk (vektor yang tidak memiliki DNA asing) dapat diidentifikasi dari vektor rekombinan (vektor yang memiliki DNA asing). Ada beberapa jenis vector sebagai berikut:
• Plasmid
• lambda phages
• cosmids
• bacterial artificial chromosomes (BACs)
• yeast artificial chromosomes (YACs)
1) Vektor Plasmid
Plasmid adalah molekul DNA untai ganda, melingkar, mereplikasi diri, ekstra kromosom. Vektor plasmid memiliki banyak fitur yang membuatnya sangat menguntungkan sebagai kendaraan vektor kloning, karena vektor ditemukan banyak salinan di dalam bakteri, dan dapat mereplikasi secara mandiri pada sel inangnya. Urutan lengkap plasmid telah diidentifikasi, oleh karena itu lokasi sisi pemotongan enzim restriksi telah diidentifikasi. Selain itu, plasmid lebih kecil dari kromosom sel inang. Vektor dapat dengan mudah dipisahkan dari yang lain. Fragmen DNA yang diinginkan dapat dengan mudah diisolasi dengan memotong plasmid dengan enzim
142