Page 158 - 猪场生产管理手册
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附录五:常用染色方法及染色液的配制
1.单染色法
(1)美蓝染色法
在经火焰固定过的标本片上,滴加适量美蓝染色液覆盖涂面,染色 2~3min,水
洗,晾干或吸水纸轻压吸干镜检,染色后的菌体呈蓝色。
(2)瑞氏染色法
细菌标本片自然干燥后,滴加瑞氏染色液于标本片上以固定标本,1~3min 后,
再滴加与染色液等量的磷酸盐缓冲液或中性蒸馏水于玻片上,轻轻摇晃使与染色液
混和均匀,5min 左右水洗,干后镜检,菌体呈兰色,组织细胞的胞浆将呈红色,细
胞核呈蓝色。
(3)姬姆萨染色法
血涂片或组织触片自然干燥后,用甲醇固定 3~5min,干燥后在其上滴加足量染
色液或将抹片浸入盛有染色液的染缸里,染色 30min,或者染色数小时或 24h,取出
水洗,吸干或烘干,镜检。细菌呈蓝青色,组织细胞浆呈红色,细胞核呈蓝色。
2.复染色法
(1)革兰氏染色法
①在固定好的抹片上,滴加草酸铵结晶紫染色液,染 1~3min,水洗。
②加革兰氏碘液媒染,作用 1~2min,水洗。
③加 95%酒精脱色约 30s 至 1min,水洗。
④加稀释石炭酸复红或沙黄水溶液复染 30s 左右,水洗,吸干后镜检。
结果:革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色。
(2)抗酸染色法
①初染
用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红 2~3 滴,在火焰高处徐徐加热,切勿
沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热 3~5min,
待标本冷却后用水冲洗。
②脱色
3%盐酸酒精脱色 30s~1min;用水冲洗。
③复染
用碱性美兰溶液复染 1min,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察。
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