Page 159 - 猪场生产管理手册
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结果:抗酸菌红色,非抗酸菌蓝色。
3.特殊染色法
(1)湿墨水法
①制菌液:加一滴墨水与玻片上,无菌取细菌与其充分混匀。
②加盖玻片:放一盖玻片于混合液上,向下轻压,用滤纸吸去多余液体。
镜检,可用高倍镜,菌体较暗,在其周围呈现一明亮的透明圈即为荚膜。
(2)鞭毛染色法(副品红法或 Leifson 法)
将固定好的细菌标本片上滴加副品红染色液,3min 后用水冲洗,镜检即可见到
鞭毛。
(3)芽孢染色法(改良 schaeffer-fulton 染色法)
取一支洁净的小试管,加入 2~3 滴无菌水,再往管中加入 1~2 环的菌苔,制成
浓的菌悬液,在菌悬液中加入 2~3 滴 5%孔雀绿溶液,充分混合后于沸水浴中加热染
色 15~20min,用接种环取试管底部的菌液于载玻片上,涂薄,过火焰 3 次温热固定,
再用自来水冲洗,后用 0.5%番红水溶液复染 2~3min,水洗,自然干燥,油镜观察,
芽孢为绿色,菌体为红色。
4.染色液的配制
(1)碱性美蓝染色液
甲液 美蓝 0.3g,95%酒精 30mL
乙液 0.01%苛性钾溶液 100mL
将美蓝放入研钵中,徐徐加入酒精研磨均匀后即为甲液,将甲、乙两液混和,
越夜后用滤纸过滤即成。新配制的美蓝染色不好,陈旧的染色好。
(2)瑞氏染色液
取瑞氏染料 0.1g,纯中性甘油 1mL,在研钵中混和研磨,再加入甲醇 60mL 使
其溶解,装入棕色瓶中越夜,次日过滤,盛于棕色瓶中,保存于暗处。保存越久,
染色越好。
(3)姬姆萨染色液
取姬姆萨氏染料 0.6g 加于甘油 50mL 中,置 55~60℃水浴中 1.5~2h 后,加入甲
醇 50mL,静置 1 日以上,滤过即成姬姆萨染色原液。
临染色前,于每毫升蒸馏水中加入上述原液 1 滴,即成姬姆萨染色液。应当注
意,所用蒸馏水必须为中性或微碱性,若蒸馏水偏酸,可于每 10mL 左右加入 1%碳
酸钾溶液 1 滴,使其变成微碱性。
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