Page 159 - 猪场生产管理手册
P. 159

结果:抗酸菌红色,非抗酸菌蓝色。

                 3.特殊染色法

                 (1)湿墨水法

                 ①制菌液:加一滴墨水与玻片上,无菌取细菌与其充分混匀。

                 ②加盖玻片:放一盖玻片于混合液上,向下轻压,用滤纸吸去多余液体。
                 镜检,可用高倍镜,菌体较暗,在其周围呈现一明亮的透明圈即为荚膜。


                 (2)鞭毛染色法(副品红法或 Leifson 法)

                      将固定好的细菌标本片上滴加副品红染色液,3min 后用水冲洗,镜检即可见到
                 鞭毛。

                 (3)芽孢染色法(改良 schaeffer-fulton 染色法)

                      取一支洁净的小试管,加入 2~3 滴无菌水,再往管中加入 1~2 环的菌苔,制成
                 浓的菌悬液,在菌悬液中加入 2~3 滴 5%孔雀绿溶液,充分混合后于沸水浴中加热染
                 色 15~20min,用接种环取试管底部的菌液于载玻片上,涂薄,过火焰 3 次温热固定,
                 再用自来水冲洗,后用 0.5%番红水溶液复染 2~3min,水洗,自然干燥,油镜观察,
                 芽孢为绿色,菌体为红色。

                 4.染色液的配制

                 (1)碱性美蓝染色液

                      甲液   美蓝 0.3g,95%酒精 30mL


                      乙液   0.01%苛性钾溶液 100mL

                      将美蓝放入研钵中,徐徐加入酒精研磨均匀后即为甲液,将甲、乙两液混和,
                 越夜后用滤纸过滤即成。新配制的美蓝染色不好,陈旧的染色好。

                 (2)瑞氏染色液


                      取瑞氏染料 0.1g,纯中性甘油 1mL,在研钵中混和研磨,再加入甲醇 60mL 使
                 其溶解,装入棕色瓶中越夜,次日过滤,盛于棕色瓶中,保存于暗处。保存越久,
                 染色越好。

                 (3)姬姆萨染色液


                      取姬姆萨氏染料 0.6g 加于甘油 50mL 中,置 55~60℃水浴中 1.5~2h 后,加入甲
                 醇 50mL,静置 1 日以上,滤过即成姬姆萨染色原液。

                      临染色前,于每毫升蒸馏水中加入上述原液 1 滴,即成姬姆萨染色液。应当注
                 意,所用蒸馏水必须为中性或微碱性,若蒸馏水偏酸,可于每 10mL 左右加入 1%碳

                 酸钾溶液 1 滴,使其变成微碱性。


                                                           128
   154   155   156   157   158   159   160   161   162