Page 103 - 연구활동 Guide Book Ⅱ

5. 미생물 배양

가 목표.
1) 세균을 실험실에서 인공적으로 배양하고 취급하는 방법을 이해할 수 있다.
2) 우리 주변의 물건과 인체에 묻어 있는 세균을 배양하여 확인할 수 있다.
3) 주변의 다양한 천연 물질을 찾아 항생 물질로서 활용 가능성을 판단할 수 있다.

나 준비물.
1) 약품 및 재료 아가로스: (agarose), 효모 추출물 (yeast extract), 트립톤 (tryptone), 염
화나트륨 (NaCl), 1M 수산화나트륨 (NaOH) 용액 멸균 증류수 앰피실린 세균 배양용 , , ,
고체 배지 핸드플레이트 증류수 은행나무 잎 소나무 잎 편백나무 잎 등 천연 재, , , , ,

료 추출액, 70% 에탄올
2) 기구 멸균기 항온기 전자저울 백금이 에탄올 램프 삼각 플라스크 페트리 접시: , , , , , , ,
유성 펜 고무마개 진탕 배양기 거름종이 알루미늄 포일 마이크로 튜브 멸균 면, , , , , ,
봉 알콜 램프 원형 페이퍼 디스크 대장균을 배양한 평판 고체 배지 마이크로 피, , , ,
펫 피펫 팁 핀셋 비커 유리 막대 스포이트 약숟가락 시약포지 자석 젓개 분쇄, , , , , , , , ,

기 항온기 지름 측정기 전자저울 보안경 실험용 고무장갑 실험용 장갑 마스크, , , , , , ,

다 탐구 과정.
1) LB 배지 만들기 액체 배지–
가) 500mL 의 LB 액체 배지를 준비하는 데 필요한 각 시약의 양을 다음과 같이 준비

한다.

시약의 종류 배지 1L 를 만들 때 필요한 양 배지 500mL 를 만들 때 필요한 양
효모 추출액 분말( ) 5g

트립톤 분말( ) 10g

NaCl 분말( ) 10g

NaOH (1M 용액) 1mL

아가로스 분말( ) 15g

나) 1L 삼각 플라스크에 증류수와 시약을 넣어 500mL 의 배지를 만든다.
다 삼각 플라스크의 입구를 알루미늄 포일로 씌우고 ) 121℃ 에서 15 분 동안 고압 증
기 멸균한다. 오토클레이브( )
※ 주의 사항 플라스크 입구를 포일로 꼭 잠그지 않는다 액체를 플라스크 용기: .

에 가득 채우지 않는다. 절반 정도 채우는 것을 권장( )
라 멸균 후 삼각 플라스크를 상온으로 식한다 알루미늄 포일을 벗길 때는 불꽃을 ) .
이용하여 입구를 화염 멸균한다.

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