Page 108 - 연구활동 Guide Book Ⅱ

인천고등학교

마 참고 자료.

1) 멸균
자연계에는 여러 종류의 미생물들이 존재하고 있으므
로 미생물의 조작에서 우선 해야 할 일은 멸균된 배지
를 조제하여야 한다 배지는 고온에서 멸균하여 어떠.
한 형태의 미생물도 존재하지 않도록 하는 것이 중요

하다 다음으로는 기존에 배양된 미생물을 취하여 새.
로운 배지에 접종하는 일이다 이러한 조작은 외부에.
[ 무균 작업대(Clean Bench)] ]
서 오염균이 유입되지 않도록 무균 상태에서 실시되어
야 한다 또한 미생물 조작도 클린벤치에서 이루어져야 한다. .
미생물 실험에서 사용되는 멸균 방법으로는 다음과 같은 방법이 있다.

가 화염 살균은 가스 버너나 알코올 램프의 화염을 이용하여 백금이 핀셋 시험관 ) , ,
또는 삼각플라스크와 같은 용기의 입구 등을 살균하는 방법이다 특히 백금이는 . ,
화염에 비스듬히 세워서 백금선 또는 니크롬선 이 발갛게 달구어질 때까지 한다( ) .
나 건열 살균은 드라이 오븐에서 ) 150 ~ 160℃ 의 고열로 30 ~ 60 분 동안 시험관 플라,
스크 페트리 접시 등과 같은 유리기구의 살균에 사용한다, .

다) 고압 증기 살균은 미생물 실험에서 가장 일반적으로 사용하는 살균법으로
autoclave 를 이용하여 121℃ 에서 약 분 동안 실시한다 주로 배지나 시약 등을 15 .
멸균하는데 사용하는데 고압의 수증기를 이용하기 때문에 살균 효과가 높아 세
균의 포자까지 사멸할 수 있다.

2) 미생물 배양 방법
가 호기성 배양법 호기성균 내지는 통성혐기성균인 경우에는 대개 그대로 ) : 37℃ 배양
기에 넣어 필요한 시간만큼 배양한다 목적균의 발육지적 온도에 따라 . 37 , 2℃
8 , 22℃ ℃ 등의 온도로 조절하여 공기 환경 하에서 배양하는 방법이다 접종된 .
평판은 원칙적으로 엎어서 배양한다 이것은 배지의 건조를 방지하고 세균의 오.

염을 방지하기 위함이다 특히 액체배지 배양 시 진탕배양을 하면 산소의 주입이 .
빨라 세균의 증식이 더욱 왕성해진다 대부분의 병원균은 . 35℃～ 37℃ 에서 잘 발
육하며 진균은 25 ~ 27℃ 포도당 비발효 Gram 음성 간균은 30℃ 전후의 배양이
좋다.
나) 혐기성 배양법: 혐기성 세균 중에는 Clostridium perfringens 나 Bacteroides

fragilis 등과 같이 산소 접촉에 다소 내성을 보이는 종류는 소량의 산소에 노출
되어도 쉽게 사멸하는 것들이 있다 또한 어떤 종류는 . organic peroxides 등과 같
이 배양배지가 산소와 접촉할 때 생성되는 독성 산화물질에 견디지 못하는 것도
있으므로 혐기성 세균의 배양에는 특별한 기술을 요한다 검체로부터 혐기성 세.
균을 분리하고자 할 때는 액체배지보다는 고체배지가 효율적이나 일단 얻어진

순수 배양체를 다루는 데는 액체배지가 편리하다.

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