Page 114 - Castro Fernández Arturo-Portafolio de evidencia Análisis clínicos
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4. Filtre a través de papel de filtro (por ejemplo, 90 g / m2) para eliminar los
precipitados gruesos y gelatinosos y guárdalos en una botella sellada de vidrio
oscuro.
Procedimiento
1. Mezcle bien la muestra de semen
2. Retire una alícuota de 50 ul de semen y mezcle con un volumen igual de eosina–
suspensión de nigrosina, p. en un pocillo de porcelana o en un tubo de ensayo, y
espere 30 segundos.
3. Vuelva a mezclar la muestra de semen antes de retirar una alícuota replicada y
mezclar con eosina-nigrosina y tratamiento como en el paso 2.
4. Para cada suspensión, frote un portaobjetos de vidrio y déjelo secar al aire.
5. Examine inmediatamente después del secado, o más tarde después de montar
con un medio permanente de montaje no acuoso.
6. Examine cada diapositiva con óptica de campo brillante a una magnificación de ×
1000 y aceite inmersión.
7. Calcule el número de células teñidas (muertas) o sin teñir (vitales) con la ayuda de
un contador de laboratorio
8. Evaluar 200 espermatozoides en cada réplica, para lograr un nivel aceptable bajo
error de muestreo.
9. Calcule el promedio y la diferencia de los dos porcentajes de células vitales de las
diapositivas replicadas.
10. Determine la aceptabilidad de la diferencia de porcentajes
11. Si la diferencia entre los porcentajes es aceptable, informe el promedio
porcentaje de espermatozoides vitales. Si la diferencia es demasiado alta, haga dos
nuevas preparaciones de alícuotas frescas de la muestra de semen y repita el
evaluación.