Page 115 - Castro Fernández Arturo-Portafolio de evidencia Análisis clínicos
P. 115

12.  Informe  el  porcentaje  promedio  de  espermatozoides  vitales  al  conjunto  más

               cercano número.


               Prueba de vitalidad usando eosina sola


               Este  método  es  simple  y  rápido,  pero  las  preparaciones  húmedas  no  pueden
               almacenarse para fines de control de calidad.


               Preparación de los reactivos:


               1. NaCl, 0.9% (p / v): disuelva 0.9 g de NaCl en 100 ml de agua purificada.


               2. Eosina Y, 0.5% (p / v): disuelva 0.5 g de eosina Y (índice de color 45380) en 100

               ml de


               0.9% de NaCl.


               Procedimiento


               1. Mezcle bien la muestra de semen.



               2. Retire una alícuota de 5 ul de semen y combine con 5 ul de solución de eosina en
               un  portaobjetos  de  microscopio.  Mezclar  con  una  punta  de  pipeta,  agitando  la

               muestra en el portaobjetos.


               3. Cubra con un cubreobjetos de 22 mm × 22 mm y déjelo por 30 segundos.


               4. Vuelva a mezclar la muestra de semen, retire una alícuota replicada, mezcle con
               eosina y trate como en los pasos 2 y 3.



               5.  Examine  cada  diapositiva,  preferiblemente  con  una  óptica  de contraste  de fase
               negativa  (el  contraste  de  fase  positivo  hace  que  las  cabezas  de  color  rosa  tenue

               sean difíciles de discernir) a un aumento de  ×200 o ×400.





               6. Calcule el número de células teñidas (muertas) y no teñidas (vitales) con la ayuda
               de un mostrador de laboratorio.
   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119   120