Page 115 - Castro Fernández Arturo-Portafolio de evidencia Análisis clínicos
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12. Informe el porcentaje promedio de espermatozoides vitales al conjunto más
cercano número.
Prueba de vitalidad usando eosina sola
Este método es simple y rápido, pero las preparaciones húmedas no pueden
almacenarse para fines de control de calidad.
Preparación de los reactivos:
1. NaCl, 0.9% (p / v): disuelva 0.9 g de NaCl en 100 ml de agua purificada.
2. Eosina Y, 0.5% (p / v): disuelva 0.5 g de eosina Y (índice de color 45380) en 100
ml de
0.9% de NaCl.
Procedimiento
1. Mezcle bien la muestra de semen.
2. Retire una alícuota de 5 ul de semen y combine con 5 ul de solución de eosina en
un portaobjetos de microscopio. Mezclar con una punta de pipeta, agitando la
muestra en el portaobjetos.
3. Cubra con un cubreobjetos de 22 mm × 22 mm y déjelo por 30 segundos.
4. Vuelva a mezclar la muestra de semen, retire una alícuota replicada, mezcle con
eosina y trate como en los pasos 2 y 3.
5. Examine cada diapositiva, preferiblemente con una óptica de contraste de fase
negativa (el contraste de fase positivo hace que las cabezas de color rosa tenue
sean difíciles de discernir) a un aumento de ×200 o ×400.
6. Calcule el número de células teñidas (muertas) y no teñidas (vitales) con la ayuda
de un mostrador de laboratorio.