Page 14 - e-MODUL PROJECT BASED LEARNING

b) Dilarutkan sampel dengan sesedikit mungkin pelarut, kemudian

dimasukkan silika impregnasi ke dalam ekstrak. Diaduk-aduk agar

sampel dan silika menyatu hingga keduanya mengering seperti

serbuk.

c) Dimasukkan silika kolom ke dalam gelas kimia, ditambahkan n-

heksana hingga semua silika terendam (silika basah).

d) Dimasukkan silika basah ke dalam kolom, pastikan tidak ada silika

yang mengering, selalu basahi dengan n-heksana. Pastikan tinggi

silika KKG 15-20 cm didalam kolom. Dan buka kran kolom (jika

kolom menggunakan kran).

e) Saat n-heksana hampir mendekati silika (dalam kolom), masukkan

sampel yang telah diimpreg secara perlahan ke dalam kolom, hati-

hati jangan sampai merusak silika.

f) Dimasukkan eluen yang telah disiapkan secara perlahan, jangan

sampai merusak sampel dan silika.

g) Dilakukan elusi dan eluat ditampung ke dalam vial ukuran 10 mL

untuk setiap noda yang akan turun. Penampungan dipisah dengan

vial lain untuk masing-masing noda yang berbeda. Eluen yang

digunakan bisa dimulai dari perbandingan yang dipilih, kemudian

secara gradasi ke eluen yang lebih polar. Elusi diberhentikan ketika

semua noda telah ditampung.

h) Kemudian kolom dicuci dengan metanol dan ditampung.

i) Dievaporasi semua hasil eluat, kemudian dilakukan KLT. Jika ada

terlihat noda dengan Rf yang sama pada plat KLT, makan eluat

dapat digabungkan, kemudian lakukan KLT ulang.

j) Jika tampak noda tunggal pada profil KLT, selanjutnya bisa

dilakukan uji kemurnian. Uji kemurnian menggunakan tiga

13