Page 21 - Buku Ajar Video Pembelajaran Praktikum Biokimia 1
P. 21

     protein tersebut bermuatan negatif. Selain itu, kelebihan logam berat juga dapat melarutkan kembali kompleks logam berat protein, meskipun protein tersebut tetap dalam keadaan terdenaturasi.
Protein yang larut dalam air akan membentuk ion yang mempunyai muatan positif dan negatif. Ion positif akan dihasilkan oleh molekul protein dalam suasana asam, sedangkan ion negatif akan dihasilkan oleh molekul protein dalam suasana basa. Saat berada di titik isoelektrik, protein memiliki muatan positif dan negatif yang sama, sehingga tidak bergerak ke arah elektroda positif maupun negatif apabila ditempatkan di antara kedua elektroda tersebut. pH di atas titik isoelektrik dibutuhkan untuk mengendapkan protein dengan ion berat karena pada pH di atas isoelektriknya protein bermuatan negatif sehingga dapat berikatan dengan ion positif dari logam berat (terjadi pengendapan).
3. Pengendapan dengan Garam
Pengaruh penambahan garam terhadap kelarutan protein berbeda-beda, tergantung pada konsentrasi dan jumlah muatan ionnya dalam larutan. Semakin tinggi konsentrasi dan jumlah muatan ionnya, semakin efektif garam dalam mengendapkan. Proses pengendapan protein dapat dilakukan dengan menggunkan amoniumsulfat berkonsentrasi tinggi atau larutan jenuh.
Beberapa protein berbeda dalam kelarutannya pada konsentrasi garam yang berbeda. Metode ini terutama digunakan ketika hanya satu jenis protein yang diinginkan, sedangkan protein lain tidak diperlukan. Selain garam, pengendapan protein dapat dilakukan dengan mengatur pH titik elektroforesis protein yang diinginkan. Pada titik elektroforesis, kelarutan protein berkurang seminimal mungkin dan protein yang diinginkan akan mengendap, sedangkan protein lain yang tidak diinginkan akan tetap berada dalam larutan. Pelarut organik juga dapat digunakan untuk mengendapkan protein, tetapi untuk menghindari denaturasi, proses pengendapan harus dilakukan dengan cara ini pada suhu yang lebih rendah.
14





























































































   19   20   21   22   23