Page 20 - Buku Ajar Video Pembelajaran Praktikum Biokimia 1

peptida yang berikatan atau Pembentukan warna disebabkan karena adanya kompleks ion Cu2+ dengan ikatan peptida protein.
Pada uji biuret ini tidak dilakukannya pemanasan, hal tersebut dikarenakan reagen biuret mengandung CuSO4 yang ketika dipanaskan maka akan terbentuknya Kristal, dan juga dapat merusak ikatan peptide yang terdapat dalam sampel sehingga nantinya tidak dapat terdeteksi. Hasil berupa warna ungu dipengaruhi dengan jumlah ikatan peptida pada sampel, semakin banyak ikatan peptida maka semakin pekat pula warna ungu yang dihasilkan. Ikatan peptida ialah ikatan yang yang terbentuk dari polimerisasi asam amino. Ikatan peptida terbentuk dari gugus karboksil pada asam amino dengan gugus amino dari molekul asam amino lain dengan melepaskan H2O (air).
2. Pengendapan dengan Logam
Pengendapan dengan logam merupakan uji protein dimana terjadi pembentukan senyawa tak larut antara protein dan logam berat. Protein dapat diendapkan oleh ion-ion logam berat. Pengendapan ini terjadi karena ion-ion logam berat membentuk garam proteinat yang tidak larut dalam air. Pengendapan ini terjadi disebabkan adanya reaksi penetralan muatan antara ion logam berat dengan anion dari protein. Larutan albumin ditambahkan dengan larutan HgCl2 dan larutan Pb-asetat. Kemudian larutan albumin ditambahkan dengan larutan HgCl2 dan larutan Pb-asetat, terbentuk endapan berwarna putih dari garam proteinat.
Logam berat seperti Cu2+, Hg2+ atau Pb2+ akan mendenaturasi dan mengendapkan protein. Ini terjadi ketika berbagai kelompok pada permukaan molekul protein bermuatan negatif, yang mengarah pada pembentukan garam dengan kation logam berat. Pada pH di atas titik isoelektrik protein bermuatan negatif, sedangkan di bawah titik isoelektrik protein bermuatan positif. Jumlah protein yang disimpan sebanding dengan jumlah logam berat yang ditambahkan. Semakin banyak logam berat yang ditambahkan, semakin banyak protein yang mengendap. Beberapa protein memerlukan penambahan tetes alkali supaya
13