Page 11 - 猪病防治
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可以看到各种不同的色彩,例如血红蛋白,嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结
果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或
天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染
淡紫色,称为中性物质。
(2) 姬姆萨染色法
先用甲醇固定自然干燥的血涂片 2~3min。将涂片放置 姬姆萨使用液 15~30min。涂
片用自来水冲洗,在室温中干燥待查。
姬姆萨染色液的鉴定:刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定:取 1 滴染
液于乳白 玻 板上,自行迅速扩散开,其颜色变紫红色,且有伪足形成。取 1 滴染液加 1
滴缓冲液,染液由深蓝 色立即变为紫红色。取血片进行试染检查 ,观察染色后各类细胞
的胞核、胞浆及颗粒着色情况, pH 是否合适及染色合适时间。如有上述变化,表明染液
合格,可供使用。
观察结果 染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较
好,结构显示更清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。
(3)Diff-Quik 染色法
该染色法主要用于血细胞涂片、骨髓涂片、脱落细胞涂片染色。
主要组成成分:A 溶液:主要成分为曙红和甲醇;B 溶液:主要成分为亚甲蓝;pH6.6
磷酸盐缓冲液。
染色方法有两种:
①滴染法
加 A 液覆盖整个涂片染色 20~30 秒。.用磷酸盐缓冲液稍冲洗,洗掉 A 溶液,然后稍
甩干缓冲液。.再滴加 B 溶液覆盖于整个涂片上染色 20~30 秒。水洗、干燥、镜检。
②浸染法
分别把 A 液、B 液和磷酸盐缓冲液适量倒于带盖的染缸中备用。把涂片浸泡于 A 液
中 20~30 秒。于磷酸盐缓冲液的染缸中洗掉 A 溶液,然后稍甩干缓冲液。再把涂片浸泡
于 B 溶液中 20~30 秒。水洗、干燥、镜检。
观察结果 血细胞涂片、骨髓涂片染色:红细胞呈淡红色,白细胞浆中颗粒清楚,并
显示出各种细胞特有的色彩,细胞核染成紫红色,核染色质结构清楚。
脱落细胞染色:细胞核染成紫红色,核仁染成蓝色。细胞质随着分化程度的不同,其
嗜碱性程度也有变化,呈深浅不等的蓝色。
注意事项 试剂用完后,迅速盖好,以免挥发;试剂贮存时,尽量避免高、低温环境
及阳光直射;冬季室温过低时,染色时间要适当延长。
样品要求 血细胞涂片染色,要求新鲜全血或 EDTA•K2 抗凝血;骨髓涂片染色,涂
片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或因空气潮湿而溶血,不能用
高温或火烤;脱落细胞涂片染色,采集样品并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿
片固定液固定法。一般情况下若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果会更佳。若
采用湿片固定液固定标本,固定液用后需经常过滤、更换,防止细胞交叉污染。
(三)分离血清
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