Page 1810 - บทคดยอการทดลองสนสด 58 สมบรณ_Neat

รายงานผลการทดลองสิ้นสุด ปี 2558

1. ชุดโครงการวิจัย วิจัยพัฒนาการอารักขาพืช
2. โครงการวิจัย การศึกษาและพัฒนาประสิทธิภาพการตรวจวินิจฉัยศัตรูพืช

3. ชื่อการทดลอง วิจัยพัฒนาการตรวจเชื้อแบคทีเรียสาเหตุโรคเน่าและเน่าเละของ

กล้วยไม้ ด้วยเทคนิค PCR และ Real - time PCR
Detection of Rot and Soft Rot Orchid Disease using PCR and

Real - time PCR

4. คณะผู้ดำเนินงาน ปิยรัตน์ ธรรมกิจวัฒน์ สุรีย์พร บัวอาจ 2/
1/
รุ่งนภา คงสุวรรณ์ 2/

5. บทคัดย่อ

การตรวจเชื้อแบคทีเรียสาเหตุโรคเน่าและเน่าเละของกล้วยไม้ด้วยเทคนิค PCR ทดสอบวิธีการ
ตรวจเชื้อแบคทีเรีย Burkholderia gladioli สาเหตุโรคเน่า ด้วยคู่ไพรเมอร์ที่สืบค้นจากเอกสารวิชาการ

พบการเกิดปฏิกิริยาไม่จำเพาะกับแบคทีเรียสาเหตุโรคกล้วยไม้ชนิดอื่น ทำการเปรียบเทียบลายพิมพ์
ดีเอ็นเอแบคทีเรียสาเหตุโรคกล้วยไม้ ด้วยไพรเมอร์ Box และ Eric เลือกแถบดีเอ็นเอที่จำเพาะต่อ

Burkholderia gladioli โคลนและวิเคราะห์ลำดับเบส ออกแบบไพรเมอร์ สังเคราะห์และทดสอบ
ปฏิกิริยาพีซีอาร์ พบว่า ไพรเมอร์ทั้ง 6 คู่ สามารถสังเคราะห์ดีเอ็นเอจำเพาะต่อ Burkholderia gladioli

ไพรเมอร์ที่ประสิทธิภาพดี ได้แก่ Bg_E510F/Bg_E510R1, Bg_E511F/ Bg_E511R, Bg_E5102F/

Bg_E5102R1 และ Bg_E5102F/ Bg_E5102R2 สังเคราะห์ดีเอ็นเอขนาด 220, 347, 170 และ 478
คู่เบส ตามลำดับ สำหรับการตรวจเชื้อแบคทีเรีย Erwinia carotovora subsp. carotovora และ

Erwinia chrysanthemi สาเหตุโรคเน่าเละของกล้วยไม้ โดยไพรเมอร์ ERWFOR/CHRREV, ADE1/ADE2,

CHPG/R23-1R, LF/LR และ Ec3F/Ec4R พบว่าสามารถสังเคราะห์ดีเอ็นเอจากแบคทีเรียสาเหตุโรคเน่าเละ
มีขนาด 550 (690, 720), 420, 280, 171 และ 548 คู่เบส ตามลำดับ ไพรเมอร์ LF/LR มีประสิทธิภาพ

ในการตรวจเชื้อดีสุด ทดสอบปฏิกิริยา duplex PCR ในการตรวจเชื้อแบคทีเรียสาเหตุโรคเน่าเละ

ไพรเมอร์ ADE1/ADE2 และ LF/LR สามารถทำปฏิกิริยาร่วมกันได้แถบดีเอ็นเอขนาด 420 และ 171 คู่เบส
ตามลำดับ สำหรับปฏิกิริยา Real - time PCR ในการตรวจเชื้อแบคทีเรียสาเหตุโรคกล้วยไม้ พบปัญหา

การเกิด false positive จำเป็นต้องพัฒนาคู่ไพรเมอร์และปฏิกิริยาการทดสอบให้เหมาะสมต่อไป
6. การนำผลงานวิจัยไปใช้ประโยชน์

เทคนิคพีซีอาร์สามารถใช้ในการตรวจเชื้อและจำแนกแบคทีเรียสาเหตุโรคกล้วยไม้ การตรวจ

วินิจฉัยโรค และเฝ้าระวังการติดเข้ามาของศัตรูพืชจากการนำเข้าต้นพันธุ์จากต่างประเทศ ติดตามการ
แพร่ระบาดในกล้วยไม้สกุลต่างๆ มีข้อมูลเพื่อประกอบการวินิจฉัยโรค วางแผนการจัดการโรค และการ

คัดพันธุ์ต้านทานโรค จะช่วยป้องกันปัญหาความเสียหายของธุรกิจการส่งออกกล้วยไม้ของประเทศได้

___________________________________________

1/ สำนักวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพ
สำนักวิจัยพัฒนาการอารักขาพืช
2/
1743