Page 231 - In de ban van bloedstolling
P. 231
De TG-bepaling was dus niet eenvoudig uit te voeren en erg arbeidsintensief. Toch koos Hemker ervoor om het nader te bestuderen. De belangrijkste reden daarvoor was dat hij de test voor algemeen gebruik bij patiënten geschikt wilde ma- ken. Béguin was zo betrokken bij dit project dat zij na afloop van Hemkers verblijf haar werk in Parijs opgaf om het in Maas- tricht voort te zetten, waar zij binnen een jaar op het onder- werp promoveerde. Deze samenwerking zette een reeks van verbeteringen van de techniek in die uiteindelijk resulteerde in de geautomatiseerde trombinegeneratietechniek: de Cali- brated Automated Thrombinography (CAT).
Het verbeteren en automatiseren van de conventionele TG- bepaling was een grote uitdaging. De eerste stap was om pi- petten te voorzien van een drukknop zodat het moment van meting door een computer werd vastgelegd in plaats van een stopwatch. Het trombinegehalte in de monsters wordt be- paald met behulp van chromogene substraten waarbij trombi- ne een kleurend product afgesplitst waarvan de concentratie wordt gemeten.
Chromogene en fluorogene substraten
Een enzym herkent zijn substraat aan een klein patroon op het oppervlak van dat substraat. Biochemici kunnen dat patroon nabootsen met een chromogeen of fluoro- geen substraat waar het specifieke enzym dan aanhecht en dat, zodra het substraat vrijkomt, licht van een bepaalde golflengte absorbeert en dus een kleur krijgt of gaat
207