Page 45 - PANDUAN_PRAKTIKUM_MIKROBIOLOGI 2022-2

b) Ambil 0,2 ml suspensi bakteri uji, inokulasikan ke
media NA secara merata dengan cara spread plate
dan biarkan permukaan agar mengering.
c) Secara aseptik,letakkan 1 disk antibiotik (disk yang
mengandung penisilin/ampisilin) dan 4 disk blank
(yang mengandung berbagai konsentrasi senyawa
uji antibiotik sebanyak 20 µl), serta 1 disk blank
kontrol negatif (disk yang mengandung pelarut)
pada permukaan media NA.
d) Setiap paper disk diinokulasikan dengan jarak
tertentu secara teratur, agar supaya tidak terjadi
overlapping zona hambat yang terbentuk.
e) Beri label pada dasar petri secara benar
f) Inkubasikan selama 24 jam. Amati zona keruh dan
jernih di setiap petri
g) Amati, gambar pertumbuhannya dan ukur diameter
zona jernih yang terbentuk di sekitar paper disk
dengan jangka sorong/penggaris.

D. PERTANYAAN-PERTANYAAN DISKUSI :
1. Apa perbedaan metode difusi sumuran dan difusi paper disk
yang Anda kerjakan di atas?
2. Mengapa pada preparasi mikroba uji diperlukan larutan
standar?
3. Bagaimana cara pembuatan larutan standar Mac Farland?
4. Apa fungsi dari : kontrol kontaminasi media, kontrol
pertumbuhan mikroba uji dan kontrol negatif/pelarut?
5. Mungkinkah digunakan pelarut senyawa uji yang memiliki
potensi antimikroba? Jelaskan!
6. Pertanyaan lain diberikan dosen/assisten

44