Page 34 - BUKU AJAR HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)

Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

untuk identifikasi puncak anlalit dibanding waktu retensi
4. Jelaskan variable-variabel yang berpengaruh terhadap
pelebaran pita pada kromatogram dan bagaimana cara
mencegah pelebaran pita!
5. Berikut ini adalah data dari pemisahan dengan kromatografi cair
Panjang kolom 24,7 cm Kecepatan alir 0,313 mL/menit.
Kromatogram yang diperoleh dari pemisahan campuran zat A,B,
C dan D adalah sebagai berikut :

Hitunglah :
a. Jumlah pelat teoritis pada masing-masing puncak
b. Nilai tengah dan standar deviasi untuk N
c. Jarak setara pelat teori untuk tiap puncak
d. Waktu retensi masing-masing puncak
e. Resolusi
f. Panjang kolom yang dibutuhkan untuk memperoleh R > 1,5

D. Instrumentasi HPLC

Komponen utama HPLC adalah :

1. Reservoir pelarut
Aparatus HPLC terdiri dari Zat pelarut yang dipakai polaritasnya dapat bervariasi
sistem pemompaan, tergantung dari senyawa yang dianalisis, yang perlu
injektor, kolom diperhatikan adalah bahwa tempat pelarut tersebut harus
kromatografi, fase memungkinkan untuk proses menghilangkan gas atau udara
stasioner dan mobile, yang ada dalam pelarut (biasanya oksigen dan nitrogen)
penghubung tubing dan yang mengganggu analisis karena dapat membentuk
fitting, detektor dan
gelembung pada kolom dan system detector. Degasser
perangkat pengumpulan
terdiri dari suatu pompa vakum, system destilasi, alat
data (komputer, integrator
pemanas dan suatu system pengaduk pelarut. Wadah fase
atau perekam)
gerak terbuat dari bahan yang inert terhadap fase gerak.

28