Page 32 - BUKU AJAR HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)

Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

w : lebar alas puncak pemisahan dua puncak dengan R ≥
1,5 merupakan harga resolusi ideal, dimana dua puncak
terpisah secara sempurna. Bila pada suatu analisis
diperoleh R<1,5 maka untuk meningkatkan harga R oleh
fase diam dapat dilakukan dengan menggunakan kolom
yang lebih panjang sehingga menambah jumlah pelat
teoritis.

b. Simetri

Faktor simetri atau tailing faktor yaitu terjadinya pengekoran
pada kromatogram sehingga bentuk kromatogram menjadi
tidak simetris.

Gambar 13. Pegukuran Kesimetrisan Puncak Kromatogram

....................(15)

Untuk kromatogram yang memberikan harga T = 1 berarti
kromatogram tersebut benar-benar simetris. Harga T > 1
berarti kromatogram tersebut mengekor (tailing), makin
besar harga T makin tidak efisien kolom yang dipakai. Bila
harga T < 1 berarti kromatogram mengandung (fronting).
Jadi harga T dapat digunakan sebagai pedoman untuk
melihat efisiensi kolom kromatografi.

Contoh Soal

Senyawa A dan B diketahui memiliki waktu retensi 16,40 dan 17,63
menit pada pemisahan menggunakan kolom dengan panjang 30
cm. Suatu senyawa yang tidak tertahan pada fase diam melintasi
kolom selama 1,30 menit. Lebar puncak A dan B berurutan adalah
1,11 dan 1,21 menit. Hitunglah nilai dari :
a. Resolusi (R)
b. Jumlah pelat teoritis (N)

26