Page 36 - BUKU AJAR HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)
P. 36
Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
Gambar 15. Seperangkat alat penyaring
2. Pompa
Digunakan untuk mengalirkan pelarut sebagai fase gerak
dengan kecepatan dan tekanan yang tetap. Sistem
pemompaan HPLC diperlukan untuk menghasilkan jumlah
fase gerak yang terukur pada laju alir konstan.
Sistem pemompaan yang dikendalikan oleh komputer atau
mikroprosesor mampu secara akurat mengantarkan fase
gerak dari elusi konstan (elusi konstitusional) atau berbagai
komposisi (gradien elusi), sesuai dengan program yang
ditetapkan. Dalam kasus elusi gradien, pencampuran pelarut
dapat dicapai pada sisi tekanan rendah atau tinggi dari
pompa (s). Bergantung pada sejumlah faktor termasuk
dimensi kolom, ukuran partikel dari fase diam, laju alir dan
komposisi fase gerak, tekanan operasi hingga 42.000 kPa
(sekitar 6000 psi) dapat dihasilkan.
Untuk menggerakkan fase gerak melalui kolom diperlukan
pompa. Pompa harus mampu menghasilkan tekanan 6000
psi pada kecepatan alir 0,1–10 ml/menit.
Beberapa persyaratan sistem pompa HPLC :
1) Mamberikan tekanan yang tinggi
2) Bebas dari pulsa
3) Memberikan kecepatan aliran 0,1 – 10 ml/menit
4) Aliran terkontrol dengan reprodusibilitas kurang dari
0,5% 5. Tahan karat, oleh karena itu seal pompa terbuat
dari bahan baja atau teflon
5) Dapat memberikan aliran sistem isokratik maupun
gradient Terdapat 2 jenis pompa yang banyak digunakan
dalam KCKT
30