Page 46 - BUKU AJAR HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)

Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

fase gerak murni dengan indeks bias fase gerak yang
berisi komponen sampel, sehingga dapat dianggap
sebagai detektor yang universal pada HPLC. Detektor
ini kurang sensitif dibanding dengan detektor ultraviolet
dan sangat peka terhadap perubahan suhu.
b) Detektor konduktivitas
c) Detektor tetapan dielektrika
2) Berdasar pengukuran suatu sifat yang spesifik dari
molekul sampel (disebut solute property detector) seperti
penyerapan sinar UV, fluoresensi dll.

Secara umum detektor yang ideal untuk kromatografi cair
harus memiliki semua karakteristik berikut :
a) Memiliki sensitifitas yang memadai. Kisaran umum
sensitifitas berkisar dari 10-8 hingga 1015 gram zat
terlarut per pembacaan
b) Stabil dan memiliki keterulangan yang baik
c) Respon yang linear terhadap kenaikan konsentrasi
d) Waktu respon yang singkat
e) Kemudahan pada penggunaan
f) Memiliki volume internal yang kecil untuk mengurangi
pelebaran puncak

a. Detektor UV/Vis
Sebuah varian pada jenis
detektor UV/vis, yang dapat Detektor UV merupakan detektor yang paling banyak
memberikan informasi digunakan sebagai detektor pada HPLC. Detektor UV
spektral terperinci, adalah memiliki sensitivitas dan reliabilitas yang baik serta cocok
spektrofotometer array digunakan pada banyak golongan analit, meskipun
dioda. Jenis detektor ini faktanya detector UV kurang sensitive terhadap senyawa-
memperoleh data senyawa non polar dan senyawa yang tidak memiliki
absorbansi melalui rentang gugus kromofor. Pada umumnya analit menyerap sinar
o
UV/vis tertentu dan dapat UV pada panjang gelombang 200-350 A, analit ini
memberikan kromatogram biasanya memiliki satu atau lebih ikatan rangkap (elektron
pada beberapa panjang π) atau semua analit yang memiliki electron sunyi (olefin,
gelombang yang dapat
aromatik dan semua senyawa yang mengandung gugus
dipilih, bersamaan dengan fungsi –CO, -CS, N=O dan N=N). Hubungan antara
spektrum untuk puncak yang
kosentrasi analit dan besarnya sinar yang ditransmisikan
dielusi.
sel diberikan oleh hukum Beer:

40