Page 26 - 猪病防治

实训七 猪链球菌病的实验室检测

【实训内容】
1.猪链球菌的细菌学检验。
2.猪链球菌的血清学检验。
3.猪链球菌的药敏试验。

【实训材料】解剖器械、疑似链球菌病猪（或死亡不久的尸体）、培养箱、酒精灯、
接种环、美蓝染色液、革兰氏染色液、结晶紫染液、载玻片、硫乙醇盐肉汤、血液琼脂平
板、生化管、健康 1.5~2kg 的家兔、健康小白鼠、血清肉汤培养基、乳胶凝集标准诊断试
剂盒、PBS 溶液、猪链球菌 1 型和 2 型标准阳性血清、药敏纸片、直尺。

【方法步骤】
（一）细菌学检验
1.病料的采集 根据不同病型采取不同的病料。败血症型病猪，无菌采取心、脾、肝、
肾和肺等；淋巴结脓肿型病猪，可用无菌注射器吸取未破溃淋巴结脓肿内的脓汁；脑膜炎
型病猪可以无菌采取脑脊髓液或少量脑组织。

2.染色镜检 将采集到的病料制成涂片，用碱性美蓝染色或革兰氏染色法染色后镜
检。如见到多数散在的或成双排列的短链圆形或椭圆形、无芽孢、有时见到带荚膜的革兰
氏阳性球菌，可作初步诊断。成双排列的往往占多数，注意与双球菌和巴氏杆菌的区别。

3.分离培养 怀疑为败血症的病猪，可先采取血液用硫乙醇盐肉汤增菌培养，再接种
于血液琼脂平板；若为肝、脾、脓汁、脑脊髓液等可取少许病料划线接种于血液琼脂平板
进行分离培养，37 ℃
培养 24~48h，形成针尖大、湿润、粘稠、隆起、半透明的露滴状菌
落，菌落周围出现 β 溶血环。

4.生化试验 链球菌的某些致病株可产生许多毒素和酶，如溶血素、杀白细胞素、透
明质酸酶、蛋白酶、链激酶、脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、二磷酸吡啶核苷酸酶等。不
同菌株产生不同的毒素和酶，因此生化特性也有很大差异。引起猪链球菌病主要病原的生
化特性见表实-6。

5.动物接种试验 用病料（肝、脾、脑或血液等）制成 5~10 倍乳剂或培养物，给 1.5~2kg
的家兔腹腔或皮下注射 1~2mL 或给小白鼠皮下注射 0.2~0.3mL，接种后家兔或小白鼠均于
12~48h 死亡。但应注意不同菌株其敏感性有差异。
表实-2 引起猪链球菌病主要病原的生化特性

兽疫链球菌 C 群链球菌 D 群链球菌 E 群链球菌 L 群链球菌
血清群别 C C D E L
溶血型 β β β β β

0.1%美兰牛乳 - - - - -
6.5%氯化钠 - - - - -
40%胆汁 - - - - -
PH9.6 肉汤 - - - - ？

水 马尿酸钠 － － － － ±

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