Page 24 - 猪病防治
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性凝集;注射 gG 基因缺失疫苗的猪血清与 gG 蛋白致敏乳胶抗原呈阴性凝集;伪狂犬病
毒阳性血清和注射 gG 基因缺失疫苗的猪血清与伪狂犬病毒致敏乳胶抗原均呈阳性凝集。
(2)检测试验。待检血清不需热灭活或其它方式的灭活处理。
取待检血清一滴,置于玻片上,加 gG 蛋白致敏乳胶抗原一滴,用牙签混匀,搅拌并
摇动 1~2min,3~5min 内观察结果。
(3)判定标准。gG 蛋白致敏乳胶抗原与血清反应的凝集颗粒较细,可能出现以下几
种凝集结果,即:
“++++” 全部乳胶凝集,颗粒聚于液滴边缘,液体完全透明;
“+++” 大部分乳胶凝集,颗粒明显,液体稍混浊;
“++” 约一半乳胶凝集,但颗粒较细,液体较混浊;
“+” 有少许凝集,液体呈混浊;
“-” 液滴呈原有的均匀乳状。
以出现“++”以上凝集者判为阳性凝集。
2.猪伪狂犬病 gE 鉴别诊断乳胶凝集试验同 gG 鉴别诊断乳胶凝集试验
(三)动物接种试验
1.接种病料制备 采取病猪脑组织,磨碎后,加生理盐水,制成 10%悬液,同时每毫
升加青霉素 1000IU、链霉素 1mg,放入 4 冰箱中过夜,离心沉淀,取上清液,备用。
℃
2.接种观察 取接种病料 1~2mL,皮下注射试验家兔后腿外侧部,家兔接种后 36~48h,
注射部位的皮肤发生剧痒,自行啃咬,直至掉毛、破损和出血。继之四肢出现麻痹。实验
兔多于出现症状后数小时死亡,即可判定为阳性。个别情况下,可能由于病料含毒量低,
潜伏期可延长到 7d。
【实训报告】
写一份应用乳胶凝集试验进行伪狂犬病抗体测定的报告。
附录
1.碳酸盐缓冲甘油
0.5M/L 碳酸缓冲液
Na2CO3 0.6g
NaHCO3 3.7g
去离子水 1000mL
取上述碳酸缓冲液与甘油按 9:1 的比例均匀混合,即成碳酸盐缓冲甘油。
2.磷酸盐缓冲液(PBS)
按下列配方依次加入各种试剂,充分溶解,配成甲液和乙液
甲液:
NaCl 8.0g
KCl 0.2g
KH2PO4 0.2g
Na2HPO4 0.5g
去离子水 800mL
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