Page 19 - 猪病防治

紫红色线。
（3）注意事项
① 检测样品可以是血清/血浆/全血。

② 检测卡从铝箔袋中取出后，应尽快进行实验，避免放置于空气中时间过长，试剂
吸潮后将失效。
③ 实验环境应保持一定湿度，避风，避免在过高温度下进行实验。

④ 试剂盒在室温下保存，如在 2~8℃冷藏，使用前应平衡至室温后方可打开铝箔袋
进行检测操作。
⑤ 试验方法的局限性 本试验可以对猪血清/血浆/全血样品中的猪瘟病毒和抗体进
行定性检测，但用于猪瘟诊断时应结合其它症状和检测结果。
5.猪瘟正向间接血凝试验

（1）检测前，应将冻干诊断液，每瓶加稀释液 5mL 浸泡 7~10d 后方可应用。
（2）稀释待检血清：血凝板的第 1 孔至第 6 孔各加稀释液 50µl。吸取待检血清 50µl 加
入第 1 孔，混匀后从中取出 50µl 加入第 2 孔，依此类推直至第 6 孔混匀后丢弃 50µl，从
第 1 孔至第 6 孔的血清稀释度依次为 1：2、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64。

（3）稀释阴性和阳性对照血清：在血凝板上的第 11 排第 1 孔加稀释液 60µl，加入阴
性血清 20µl 混匀后取出 30µl 丢弃，此孔即为阴性血清对照孔。
在血凝板上的第 12 排第 1 孔加稀释液 70µl，第 2~7 孔各加稀释液 50µl，取阳性血清

10µl 加入第 1 孔混匀，并从中取出 50µl 加入第 2 孔混匀后取出 50µl 加入第 3 孔……直到
第 7 孔混匀后弃 50µl，该孔的阳性血清稀释度为 1：512。
（4）在血凝板上的第 1 排第 8 孔加稀释液 50µl，作为稀释液对照孔。
（5）判定方法和标准：先观察阴性血清对照孔和稀释液对照孔，红血球应全部沉入

孔底，无凝集现象“-”或呈“+”的轻度凝集为合格；阳性血清对照呈“+++”凝集为合
格。
在以上 3 孔对照合格的前提下，观察待检血清各孔的凝集程度，以呈“++”凝集的待
检血清最大稀释度为其血凝效价（血凝价）。血清的血凝价达到 1：16 为免疫合格。
“-”表示红细胞 100%沉于孔底，完全不凝集；

“+”表示约有 25%的红细胞发生凝集；
“++”表示 50%红细胞出现凝集；
“+++”表示 75%红细胞凝集；
“++++“表示 90~100%红细胞凝集。

注意事项：
（1）勿用 90°~130°血凝板，以免误判。
（2）污染严重或溶血严重的血清样品不宜检测。
（3）冻干血凝抗原，必须加稀释液浸泡 7~10d，方可使用，否则易发生自凝现象。

（4）用过的血凝板，应及时冲冼干净，勿用毛刷或其他硬物刷洗板孔，以免影响孔
内光洁度。
（5）使用血凝抗原时，必须充分摇匀，瓶底应无血球沉积。

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