Page 83 - MODUL ANALISIS MIKROBIOLOGI_Neat

dalam sampel cairan yangdiamati menggunakan metode counting chamber,

misalnya dengan alat Petroff-HausserBacteria Counter (PHBC) untuk menghitung

bakteri atau dengan alat haemocytometeruntuk menghitung khamir, spora, atau

sel-sel yang ukurannya relatif lebih besar daribakteri.

Jumlah sel hidup dapat ditetapkan dengan metode plate count atau

colony count,dengan cara ditaburkan pada medium agar sehingga satu sel hidup

akan tumbuhmembentuk satu koloni, jadi jumlah koloni dianggap setara dengan
jumlah sel. Cara iniada dua macam, yaitu metode taburan permukaan (spread

plate method) dan metodetaburan (pour plate method).

Cara lain untuk menghitung jumlah sel hidup adalahdengan filter
membran dan MPN (Most Probable Number) yang menggunakan mediumcair.

Sampel mikrobia yang dihitung biasanya dibuat seri pengenceran.Pertumbuhan

sel dapat diukur dari massa sel dan secara tidak langsung denganmengukur

turbiditas cairan medium tumbuh. Massa sel dapat dipisahkan dari
cairanmediumnya menggunakan alat sentrifus (pemusing) sehingga dapat diukur

volumemassa selnya atau diukur berat keringnya (dikeringkan dahulu dengan
0
pemanasan padasuhu 90-110 C semalam). Umumnya berat kering bakteri adalah

10-20 % dari beratbasahnya.

Turbiditas dapat diukur menggunakan alat photometer (penerusan

cahaya),semakin pekat atau semakin banyak populasi mikrobia maka cahaya yang

diteruskansemakin sedikit. Turbiditas juga dapat diukur menggunakan
spektrofotometer (opticaldensity/ OD), yang sebelumnya dibuat kurva standart

berdasarkan pengukuran jumlahsel baik secara total maupun yang hidup saja

atau berdasarkan berat kering sel. Unitphotometer atau OD proporsional dengan

massa sel dan juga jumlah sel, sehingga caraini dapat digunakan untuk
memperkirakan jumlah atau massa sel secara tidak langsung.

D. Menentukan Ukuran Mikroorganisme

Mikroba berukuran sangat kecil dan untuk mengetahuinya digunakan

mikrometer. Mikrometer merupakan kaca berskala dan dikenal 2 jenis

micrometer yaitu mikrometer okuler dan mikrometer objektif. Mikrometer okuler

82