Page 22 - Fascicolo Brevetto GTI

Dott. Agronomo ed Enologo Buiani Aldo
Corso Umberto, 84 - 09074 Ghilarza (OR) Cell.: +39 3402409457 E-mail: aldobuiani@tiscali.it aldobuiani@gmail.com a.buiani@conafpec.it
C.F.: BNULDA76P24B354C - P.IVA: 01159280955
100μl di inoculo di S. enteritidis (~ 105 ufc / ml) sono stati aggiunti nei pozzetti. Le colture sono state incubate con agitazione a 30 ° C per 24 ore. Dopo questo tempo le cellule in ogni pozzetto sono state enumerate su piastre di diluizione. Questo esperimento è stato eseguito in quadruplicati. Per il dosaggio di S. aureus i dischi Abeego sono stati lasciati in 1 ml di terreno LB in una piastra per microtitolazione
per 72 ore. Quindi 100μl di inoculo di S. aureus (~ 106 cfu / ml) sono stati aggiunti
nei pozzetti. Le colture sono state incubate con agitazione a temperatura ambiente per 40 ore. Dopo questo tempo le cellule in ogni pozzetto sono state enumerate su piastre
di diluizione. Questo esperimento è stato eseguito in pentaplicati. Per entrambi gli esperimenti i dati sono stati analizzati utilizzando T-test spaiati.
Per gli esperimenti sul lievito i dischi di Abeego sono stati lasciati nel mezzo YPAD
in una piastra per microtitolazione per 24 ore. Quindi l'inoculo da una coltura notturna di S. cerevisiae (~10!−6 cfu / ml) è stato utilizzato per avviare le colture fresche. Le colture con e senza la pellicola di Abeego sono state coltivate a temperatura ambiente per 48 ore. Dopo questo tempo le cellule in ogni pozzetto sono state enumerate su piastre di diluizione. Queste analisi sono state eseguite in triplicato. Per questo esperimento i dati sono stati analizzati utilizzando un T-test spaiato. Per l'esperimento M13 ~1!03 particelle fasiche sono state sospese in un mezzo LB in una piastra per microtitolazione. Le fasi sono stati incubati con e senza pellicola di Abeego sterile, a temperatura ambiente con agitazione. Dopo 50 ore, è stato eseguito il test della placca inoculando il fago con il ceppo JM109 in agar morbido LB e creando una sovrapposizione. Per l'esperimento P1 / vir ~ !106 particelle fasiche sono state sospese nel mezzo LB in una piastra per microtitolazione. Le fasi sono stati incubati con e senza pellicola di Abeego sterile, a temperatura ambiente con agitazione. Dopo 24 ore, è stato eseguito il test della placca inoculando il fago con il ceppo DH10B in agar morbido LB e creando una sovrapposizione.
Per testare lo spettro di attività antibatterica dei prodotti commerciali, è stata condotta una zona di inibizione contro i batteri che sono alcuni dei più comuni patogeni di origine alimentare e contaminanti ambientali. Il saggio della zona di inibizione è stato utilizzato in quanto consente una rapida determinazione di un effetto inibitorio di una data sostanza. L'impatto della pellicola di Abeego e dei suoi componenti è stato confrontato con un controllo positivo sotto forma di dischi antibiotici. Dopo l'incubazione nessuna zona di inibizione è stata osservata con tessuto Abeego, cera
d'api, olio e resina contro nessuno dei batteri analizzati. Allo stesso tempo il controllo