Page 14 - E-Handout Jamur
P. 14

Pembuatan  Media
                                    Sebanyak  15,8  gr  serbuk  media  potato  dextrose  agar  (PDA)
                                    dilarutkan  dalam  500  ml  aquades,  kemudian  didihkan.  Setelah
                                    mendidih    dituangkan   ke   dalam   erlenmeyer   dan    ditutup

                                    menggunakan  kapas  yang  telah  dibungkus  dengan  kertas  payung.

                                    Selanjutnya  disterilisasi  di  dalam  autoklaf  selama  15  menit  pada

                                       suhu  121 ℃ dengan  tekanan  1,5 atm.



                                                                                Peremajaan  Jamur
                      Media  PDA  yang  telah  disterilisasi  dituangkan  kedalam
                       tabung  reaksi.  Tabung  reaksi  diletakkan  dalam  posisi  miring.
                      Setelah  media  PDA  memadat,  jamur  digorekan  secara  zig

                      zag  pada  permukaan  PDA,  kemudian  diinkubasi  pada  suhu
                      37℃ selama  7 hari.


                      Pembuatan  Standar  MC. Farland
                                         Sebanyak  0,05  mL  BaCl₂  1  %  dimasukkan  ke  tabung  reaksi
                                         dan  ditambahkan  9,95  mL  H₂SO₄  1%.  Kemudian,  tabung

                                         reaksi   ditutup   dengan   aluminium   foil,   dihomogenkan
                                         menggunakan  vortex.



                                                                       Pembuatan  Suspensi Jamur
                      Biakan  jamur  diambil  sebanyak  1  ose  ditambahkan  ke

                      dalam  tabung  reaksi  yang  berisi  media  cair  sabouraud
                      dextrose  broth  (SDB)  1  mL  dan diinkubasi selama 24 jam.
                      Kemudian,  kultur  jamur  tersebut  diambil  sebanyak  0,1  mL,

                      ditambahkan  10  mL  NaCl  fisiologis  0,9%.  Selanjutnya,
                      suspensi  jamur  tersebut  diambil  0,1  mL  dan  dimasukkan  ke
                      dalam  media  SDB 9 mL  dan digojog  hingga  homogen.



                     Uji Aktivitas
                                           Uji  aktivitas  menggunakan  metode  kirby-baeur  atau  kertas
                                           cakram.  Kertas  cakram  direndam  dalam  ekstrak  metanol
                                           dan  etil  asetat  dengan  berbagai  konsentrasi,  serta  aquades
                                           (kontrol  negatif)  dan  dithane  M-45  (kontrol  positif),

                                           kemudian  kertas  cakram  diletakkan  di  atas  permukaan
                                           media  PDA  yang  telah  diinokulasi  jamur.  Selanjutnaya
                                           diinkubasi  selama  48  jam.  Setelah  diinkubasi,  dilakukan
                                           pengukuran  zona bening  disekitar  kertas cakram.



                Sekilas Info
                       PDA  termasuk  media  semi  sintetik  karena  terbuat  dari  kentang  (bahan  alami),

                        dextrose  dan  agar  (bahan  sintetik).  Media  PDA  merupakan  media  yang cocok
                       untuk  pertumbuhan  jamur  sebab  memilki  pH  yang  rendah  yaitu  4,5  sampai
                       5,6 sehingga  terhindar  dari kontaminasi  bakteri (Octavia  & Wantini,  2017).






                                                   E-HANDOUT  JAMUR                                                 10
   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19