Page 92 - BBLP ejournal2018.docx
P. 92
วารสารเทคโนโลยีชีวภาพการผลิตปศุสัตว์
Table 1 Factorial in Randomized Complete Block Design.
Factor1 Egg yolk tris extender Egg yolk tris extender
supplement Equex STM
Factor2 Concentration 100 Concentration 150 Concentration 100 Concentration 150
million sperms/dose million sperms/dose million sperms/dose million sperms/dose
Block Buck1 Buck2 Buck1 Buck2 Buck1 Buck2 Buck1 Buck2
น ้าเชื้อที่รีดเก็บได้จากพ่อพันธุ์แพะน ามาปั่นล้างเซมินอลพลาสมา ด้วยเครื่องปั่นเหวี่ยงความเร็ว
1,500 รอบ/นาที นาน 10 นาที แยกเอาสารละลายส่วนบนทิ้ง น าเอาเฉพาะอสุจิที่จับตัวกันอยู่ส่วนล่างมา
แบ่งเป็น 4 ส่วนเท่าๆ กัน เจือจางด้วยน ้ายาเจือจาง และค านวณความเข้มข้นของอสุจิตามกลุ่มทดลอง
จากนั้นน าไปบ่มในตู้เย็นควบคุมอุณหภูมิ 4-5 องศาเซลเซียสเพื่อให้ตัวอสุจิปรับสมดุลเป็นเวลา 4 ชั่วโมง
จากนั้นบรรจุน ้าเชื้อลงในหลอดน ้าเชื้อขนาด 0.25 มิลลิลิตรท าการแช่แข็งด้วยการอังหลอดบรรจุน ้าเชื้อ
เหนือไอไนโตรเจนเหลวที่อุณหภูมิ -120 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 15 นาที และเก็บรักษาไว้ภายใต้ระดับ
ไนโตรเจนเหลวในถังเก็บน ้าเชื้อ
การตรวจคุณภาพน ้าเชื้อ
สุ่มน ้าเชื้อแช่แข็งแต่ละสัปดาห์ๆ ละ 3 หลอด เพื่อตรวจคุณภาพ ด้วยการละลายโดยแช่ในน ้าอุ่นที่
อุณหภูมิ 35-37 องศาเซลเซียส นาน 30 วินาที จากนั้นตรวจคุณภาพน ้าเชื้อด้วยเครื่องตรวจวิเคราะห์
คุณภาพน ้าเชื้อ CASA โปรแกรม CEROSII Animalbreeders, Hamilton Thorne USA.ดังนี้
1. อัตราการเคลื่อนที่ของอสุจิ (motility; %)
2. อัตราการเคลื่อนที่ไปข้างหน้าของอสุจิ (progressive motility; %)
3. ความเร็วในการเคลื่อนที่ของอสุจิ (velocity) ได้แก่
- Average path velocity; VAP (µm/s) หมายถึง ความเร็วในการเคลื่อนที่เฉลี่ยจากระยะทางจริง
ใน 1 วินาที
- Straight-line velocity; VSL (µm/s) หมายถึง ความเร็วในการเคลื่อนที่วิถีตรง เป็นการค านวณ
จากจุดหนึ่งไปยังอีกจุดหนึ่งในแนวเส้นตรงในช่วงระยะเวลา 1 วินาที
- Curvilinear velocity; VCL (µm/s) หมายถึงความเร็วในการเคลื่อนที่วิถีโค้งเป็นการค านวณ
แนวโน้มของการเคลื่อนที่เฉลี่ยใน 1 วินาที
4. ลักษณะการเคลื่อนที่ (kinetic movement) ได้แก่
- Amplitude of lateral head displacement; ALH (µm) คือความกว้างของส่วนหัวของตัวอสุจิที่
ส่ายไปมา
82