Page 26 - TEKPEM BIOTEKNOLOGI
P. 26
19
Proses DNA rekombinan melibatkan beberapa
langkah, antara lain:
a. Isolasi DNA
Dilakukan untuk menyeleksi DNA yang
diinginkan.
Langkah-langkah proses isolasi DNA, sebagai
berikut:
1). Isolasi jaringan
Langkah awal adalah mengisolasi jaringan yang
mengandung DNA yang diinginkan.
2). Pelisisan dinding sel dan membran sel
Dinding sel dan membran sel dilisis (pecah)
menggunakan teknik seperti homogenisasi atau
sentrifugasi dengan kecepatan tinggi. Ini penting
untuk mengakses inti sel di mana gen yang
diinginkan terkonsentrasi.
3). Ekstraksi dalam larutan
Supernatan (bagian cair setelah sentrifugasi)
dibuang, dan ekstraksi dilakukan dalam larutan
untuk mengisolasi DNA.
4). Purifikasi
DNA yang diekstraksi kemudian dimurnikan
dengan menghilangkan zat-zat tambahan, seperti
menggunakan RNAse untuk menghilangkan RNA
yang bisa menjadi kontaminasi.
5). Presipitasi
DNA kemudian diendapkan dengan larutan
presipitasi, yang bertujuan untuk memisahkan
DNA dari protein histon dan lainnya. Ini dilakukan