Page 37 - Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
P. 37
Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
diinjeksikan secara manual). Pada posisi LOAD, sampel
loop (cuplikan dalam putaran) diisi pada tekanan
atmosfir. Bila katup difungsikan, maka cuplikan di dalam
putaran akan bergerak ke dalam kolom.
Gambar 17. Loop sampel untuk HPLC
Autoinjektor
Autoinjektor mempunyai cara kerja yang hampir sama
dengan cara kerja sistem injeksi dengan menggunakan pipa
dosis. Keuntungan sistem ini adalah volume yang
diinjeksikan tidak akan berkurang selama proses injeksi dan
mampu memisahkan sampel-sampel dalam jumlah yang
banyak dan waktu yang singkat.
4. Kolom kromatografi
Kolom yang dipakai memiliki panjang 10 – 25 cm dan
diameter 4,5 – 5 mm yang diisi dengan fase diam beukuran
5-10 mikrometer dan terbuat dari logam atau stainless steel.
Kolom biasanya terbuat dari stainless steel yang dipoles,
berdiameter antara 50 dan 300 mm dan memiliki diameter
dalam antara 2 dan 5 mm. Mereka biasanya diisi dengan
fase diam dengan ukuran partikel 3-10 μm. Kolom dengan
diameter dalam kurang dari 2 mm sering disebut kolom
microbore. Idealnya suhu fase gerak dan kolom harus dijaga
konstan selama analisis. Sebagian besar pemisahan
dilakukan pada suhu kamar namun kolom dapat dipanaskan
dengan menggunakan, misalnya, bak pemandian air, blok
pemanas atau oven kolom untuk mencapai efisiensi yang
lebih baik.
33
