Page 40 - Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
P. 40
Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
oleh fase gerak, sehingga dapt mencegah pengikisan fase
diam oleh fase gerak.
Gambar 20. Kolom pelindung
5. Fase Diam
Pemisahan obat-obatan biasanya dicapai dengan memilah
Ingat Kembali...
senyawa dalam larutan uji antara fase gerak dan diam.
Sistem HPLC yang terdiri dari Ada banyak jenis fase diam yang digunakan dalam HPLC
fase diam polar dan fasa termasuk: silika yang tidak dimodifikasi, alumina atau
gerak non-polar grafit berpori, digunakan dalam kromatografi fase normal,
digambarkan sebagai dimana pemisahan didasarkan pada perbedaan adsorpsi;
kromatografi normal; berbagai pendukung yang dimodifikasi secara kimia yang
sebaliknya, bila fase diam dibuat dari polimer, silika atau grafit berpori, digunakan
non polar dan fase gerak dalam HPLC fase balik, dimana pemisahan terutama
polar disebut kromatografi didasarkan pada pemisahan molekul antara fasa gerak dan
fase terbalik. fase diam; resin atau polimer dengan kelompok asam
atau dasar, digunakan dalam kromatografi pertukaran ion,
dimana pemisahan didasarkan pada persaingan antara ion
yang akan dipisahkan dan yang ada dalam fase gerak; silika
berpori atau polimer.
Sebagian besar pemisahan didasarkan pada mekanisme
partisi dengan menggunakan silika yang dimodifikasi secara
kimia sebagai fase diam dan pelarut polar sebagai fase
gerak (fase terbalik HPLC). Permukaan dukungan, mis.
Silika gugus silanol silika, direaksikan dengan berbagai reagen
silan untuk menghasilkan turunan silil terikat kovalen yang
mencakup sejumlah jumlah situs aktif pada permukaan
pendukung. Sifat fase berikat merupakan parameter penting
untuk menentukan sifat pemisahan sistem kromatografi.
36
