Page 39 - Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
P. 39
Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
dibandingkan dengan kolom konvensional dp = 10, sebab
sela-sela partikel lebih mudah tertutup oleh kotoran. Jadi
harus seringkali dicuci dan kemurnian fase gerak harus
dijaga.
b. Kolom Preparatif
Kolom preparative digunakan untuk memisahkan
komponen-komponen analit dalam jumlah besar.
Biasanya pada kromatografi preparative kita dapat
mengumpulkan tiap-tiap eluate yang keluar dari kolom.
Karena sampel yang dipisahkan pada kromatografi
preparative biasanya dalam jumlah yang relative lebih
besar, maka kolom preparative biasanya juga memiliki
diameter dalam dan panjang relative lebih besar dari
kolom analitik. Umumnya kolom preparative memiliki
diameter dalam 6 mm atau lebih dan panjang 25-100 cm.
Gambar 19. Perbedaan diameter dan panjang dari kolom
analitik dan kolom preparative
Kolom pelindung/guard colomn (pre-kolom)
Kolom pelindung merupakan suatu kolom dengan ukuran
pendek (5 cm), yang dikemas dengan kemasan yang
sama dengan kolom analitik. Kolom pelindung diletakkan
pada bagian hulu kolom analtik. Kolom pelindung dapat
memperpanjang umur dari kolom analitik, adanya bahan-
bahan yang dapat terikat secara irreversible pada kolom
analitik dapat menyebabkan kolom analitik tidak dapat
digunakan lagi, dengan adanya kolom pelindung maka
senyawa-senyawa tersebut diiikat oleh kolom pelindung
sehingga tidak masuk ke dalam kolom analitik. Kolom
pelindung juga dapat membantu penjenuhan fase diam
35