Page 39 - Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
P. 39

Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)






                                                dibandingkan dengan kolom konvensional dp = 10, sebab
                                                sela-sela partikel lebih mudah tertutup oleh kotoran. Jadi
                                                harus  seringkali  dicuci  dan  kemurnian  fase  gerak  harus
                                                dijaga.

                                             b. Kolom Preparatif

                                                Kolom     preparative    digunakan     untuk     memisahkan
                                                komponen-komponen         analit   dalam     jumlah    besar.
                                                Biasanya  pada  kromatografi  preparative  kita  dapat
                                                mengumpulkan  tiap-tiap  eluate  yang  keluar  dari  kolom.
                                                Karena  sampel  yang  dipisahkan  pada  kromatografi
                                                preparative    biasanya  dalam  jumlah  yang  relative  lebih
                                                besar,  maka  kolom  preparative  biasanya  juga  memiliki
                                                diameter  dalam  dan  panjang  relative  lebih  besar  dari
                                                kolom  analitik.  Umumnya  kolom  preparative  memiliki
                                                diameter dalam 6 mm atau lebih dan panjang 25-100 cm.
















                                                 Gambar 19. Perbedaan diameter dan panjang dari kolom
                                                               analitik dan kolom preparative

                                                Kolom pelindung/guard colomn (pre-kolom)
                                                Kolom pelindung merupakan suatu kolom dengan ukuran
                                                pendek  (5  cm),  yang  dikemas  dengan  kemasan  yang
                                                sama dengan kolom analitik. Kolom pelindung  diletakkan
                                                pada  bagian  hulu  kolom  analtik.  Kolom  pelindung  dapat
                                                memperpanjang umur dari kolom analitik, adanya bahan-
                                                bahan yang dapat terikat secara irreversible  pada kolom
                                                analitik  dapat  menyebabkan  kolom  analitik  tidak  dapat
                                                digunakan  lagi,  dengan  adanya  kolom  pelindung  maka
                                                senyawa-senyawa  tersebut  diiikat  oleh  kolom  pelindung
                                                sehingga  tidak  masuk  ke  dalam  kolom  analitik.  Kolom
                                                pelindung  juga  dapat  membantu  penjenuhan  fase  diam








                                                                                                                  35
   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44