Page 44 - Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
P. 44

Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)






                                                   fase gerak murni dengan indeks bias fase gerak yang
                                                   berisi  komponen  sampel,  sehingga  dapat  dianggap
                                                   sebagai detektor yang universal pada HPLC. Detektor
                                                   ini kurang sensitif dibanding dengan detektor ultraviolet
                                                   dan sangat peka terhadap perubahan suhu.
                                               b)  Detektor konduktivitas
                                               c)  Detektor tetapan dielektrika
                                             2) Berdasar  pengukuran  suatu  sifat  yang  spesifik  dari
                                                molekul sampel (disebut solute property detector) seperti
                                                penyerapan sinar UV, fluoresensi dll.

                                             Secara  umum  detektor  yang  ideal  untuk  kromatografi  cair
                                             harus memiliki semua karakteristik berikut :
                                                 a)  Memiliki  sensitifitas  yang  memadai.  Kisaran  umum
                                                    sensitifitas  berkisar  dari  10-8  hingga  1015  gram  zat
                                                    terlarut per pembacaan
                                                 b)  Stabil dan memiliki keterulangan yang baik
                                                 c)  Respon yang linear terhadap kenaikan konsentrasi
                                                 d)  Waktu respon yang singkat
                                                 e)  Kemudahan pada penggunaan
                                                 f)  Memiliki volume internal yang kecil untuk mengurangi
                                                    pelebaran puncak

                                             a. Detektor UV/Vis
            Sebuah varian pada jenis
            detektor UV/vis, yang dapat         Detektor  UV  merupakan  detektor  yang  paling  banyak
            memberikan informasi                digunakan  sebagai  detektor  pada  HPLC.  Detektor  UV
            spektral terperinci, adalah         memiliki sensitivitas dan reliabilitas yang baik serta cocok
            spektrofotometer array              digunakan  pada  banyak  golongan  analit,  meskipun
            dioda. Jenis detektor ini           faktanya detector UV kurang sensitive terhadap senyawa-
            memperoleh data                     senyawa  non  polar  dan  senyawa  yang  tidak  memiliki
            absorbansi melalui rentang          gugus  kromofor.  Pada  umumnya  analit  menyerap  sinar
                                                                                               o
            UV/vis tertentu dan dapat           UV  pada  panjang  gelombang  200-350 A,  analit  ini
            memberikan kromatogram              biasanya memiliki satu atau lebih ikatan rangkap (elektron
            pada beberapa panjang               π) atau semua analit yang memiliki electron sunyi (olefin,
            gelombang yang dapat
                                                aromatik  dan  semua  senyawa  yang  mengandung  gugus
            dipilih, bersamaan dengan           fungsi  –CO,  -CS,  N=O  dan  N=N).  Hubungan  antara
            spektrum untuk puncak yang
                                                kosentrasi analit dan besarnya sinar yang  ditransmisikan
            dielusi.
                                                sel diberikan oleh hukum Beer:








                                                                                                                  40
   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49