Page 10 - BUKU AJAR HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)

Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

 Ekuilibrium baru mengikuti penambahan eluen segar:
molekul sampel dalam fase gerak sebagian teradsorbsi
pada permukaan fasa diam, sesuai dengan koefisien
distribusinya, sedangkan molekul yang sebelumnya telah
teradsorpsi muncul lagi di fase gerak.

 Setelah mengulangi proses ini berkali-kali, kedua
komponen tersebut akhirnya terpisah. Komponen lebih
menyukai fase gerak dan bermigrasi lebih cepat
daripada komponen , yang cenderung 'menempel' pada
fase diam.

 Seperti ditunjukkan diagram, di sini keseimbangan baru
ditemukan di sepanjang bagian yang berhubungan
dengan partikel fase diam. Oleh karena itu, jarak ini
mewakili lempeng teoritis. Semakin panjang kolom
kromatografi, makin banyak pelat teoritis dan semakin
baik tingkat pemisahan campuran. Efek ini sebagian
dikompensasikan dengan band broadening (luas
puncak). Dari hasil percobaan menunjukkan, zona zat
menjadi semakin luas, semakin besar jarak sepanjang
kolom dan semakin lama waktu retensi.

2. Jenis-jenis Kromatografi

Berdasarkan fase gerak yang digunakan, kromatografi
dibedakan menjadi dua golongan besar, yaitu gas
chromatography dan liquid chromatography. Masing-masing

4