Page 13 - BUKU AJAR HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)
P. 13
Buku Ajar High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
C. Prinsip Teoritis High Performance Liquid
Chromatography (HPLC)
HPLC singkatan dari ”High Perfomance Liquid Chromatography”
Analisis kuantitatif
atau ”High Pressure Liquid Chromatography”, kadang-kadang
dengan teknik HPLC
HPLC diistilahkan LC (Liquid Chromatography) atau di Indonesia
didasarkan kepada
diistilahkan KCKT (Kromatografi Cair Kinerja Tinggi).
pengukuran luas atau
area puncak analit dalam Perkembangan HPLC berawal dari proses pemisahan yang
kromatogram, berazaskan absorpsi dari partisi ke arah yang lebih luas yaitu
dibandingkan dengan proses pemisahan yang berazaskan afinitas, filtrasi gel, dan ion
luas atau area larutan yang berpasangan, akan tetapi proses pemisahannya tetap
standar dilaksanakan di dalam kolom disertai pemakaian pelarut
pengembang dengan tekanan tinggi.
High Performance Liquid Chromatography (HPLC) adalah teknik
kromatografi yang menggunakan fase gerak cair dan fase diam
cair untuk melakukan pemisahan dan analisis (kualitatif dan
kuantitatif). Dari sistem peralatannya, HPLC termasuk
kromatografi kolom karena dipakai fase diam yang diisikan atau
terpacking di dalam kolom. HPLC merupakan teknik pemisahan
yang dapat digunakan untuk analisis molekul organik dan ion.
HPLC didasarkan pada mekanisme adsorpsi, partisi, dan
pertukaran ion, tergantung pada jenis fase diam yang digunakan.
HPLC melibatkan fase diam yang solid, biasanya dikemas di
dalam kolom stainless steel, dan fase gerak cair. Pemisahan
komponen larutan dihasilkan dari selisih rasio distribusi relatif zat
terlarut di antara dua fase.
HPLC dapat digunakan untuk menilai kemurnian dan/atau
menentukan kandungan yang terdapat dalam suatu senyawa.
Selain itu, HPLC juga dapat digunakan untuk menentukan
komposisi enantiomerik yaitu dengan fase gerak yang sesuai
(modifikasi) atau dengan menggunakan fase diam yang sesuai.
Mekanisme pemisahan masing-masing senyawa dari proses
adsorpsi, pertukaran partisi, dan ion jarang terjadi secara
terpisah karena beberapa prinsip bertindak sampai tingkat
tertentu secara bersamaan.
Teknik HPLC merupakan satu teknik kromatografi cair-cair yang
dapat digunakan baik untuk keperluan pemisahan maupun
analisis kuantitatif. Pada prakteknya, perbandingan kurang
7
